實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(簡(jiǎn)稱Real-time PCR)具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好、定量、速度快、全封閉反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)，受到生物學(xué)家們的青睞，促進(jìn)了生命科學(xué)的發(fā)展。該技術(shù)是目前確定樣品中DNA或RNA拷貝數(shù)最敏感、最的方法，還可進(jìn)行多重反應(yīng)，無污染，自動(dòng)化程度高，在生物學(xué)的所有學(xué)科、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和藥學(xué)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
本書在介紹實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)原理基礎(chǔ)上，集中論述該技術(shù)在各個(gè)領(lǐng)域中的應(yīng)用，包括檢測(cè)致病菌、檢測(cè)病毒、檢測(cè)基因突變和臨床、遺傳病研究、腫瘤研究、環(huán)境微生物檢測(cè)、動(dòng)物學(xué)研究、基因表達(dá)檢測(cè)和流行病學(xué)等。在編寫時(shí)力求方法盡可能詳細(xì)，對(duì)每一種方法提供了反應(yīng)體系、反應(yīng)條件和結(jié)果分析，還附有參考文獻(xiàn)，但讀者在具體應(yīng)用時(shí)，也不宜照本宣科，在實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)因事制宜，對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行必要的優(yōu)化。
本書可供分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等生物學(xué)科，醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)、藥學(xué)等學(xué)科高年級(jí)本科生、研究生以及其他研究人員閱讀參考。
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及時(shí)章實(shí)時(shí)熒光定量PCR概述
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR的基本原理
一、引言
二、原理
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
一、Applied Biosystems公司的系列實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
二、iQTM 5實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
三、LightCycler實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
四、SmartCycler System實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
五、Mx3000P實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
六、Rotor?Gene實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
第三節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR中的熒光化學(xué)物質(zhì)
一、熒光染料
二、水解探針
三、分子信標(biāo)
四、熒光標(biāo)記引物
五、雙探針雜交
六、復(fù)合探針
第四節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR的定量方法
一、定量
二、相對(duì)定量
第五節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR的實(shí)驗(yàn)方法
一、以DNA為起始實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)
二、以RNA為起始實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量RT?PCR
第六節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的問題
一、擴(kuò)增子的設(shè)計(jì)
二、實(shí)驗(yàn)方案的優(yōu)化
三、實(shí)踐中應(yīng)該注意的問題
小結(jié)
本章參考文獻(xiàn)
第二章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在病原菌檢測(cè)中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)沙門菌的檢測(cè)
一、引言
二、材料
三、方法
四、注意事項(xiàng)
五、應(yīng)用
六、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第二節(jié)在幽門螺桿菌檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、基本原理
三、試驗(yàn)材料
四、方法
五、注意事項(xiàng)
六、應(yīng)用
七、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第三節(jié)在致病性大腸桿菌檢測(cè)中的應(yīng)用
一、檢測(cè)DNA樣品中fliCH7基因的Real?time PCR方法
二、檢測(cè)RNA樣品中rfbE和eae基因的Real?time PCR方法
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第四節(jié)在肉毒梭菌檢測(cè)中的應(yīng)用
方案一SYBR Green Ⅰ Real?time PCR方法檢測(cè)A型肉毒梭菌
一、引言
二、原理
三、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
四、實(shí)驗(yàn)材料和方法
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
六、討論
方案二用TaqMan Real?time PCR對(duì)A型、B型和E型肉毒梭菌的檢測(cè)
一、引言
二、原理
三、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
四、實(shí)驗(yàn)材料和方法
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
六、討論
方案三TaqMan Real?time PCR 在肉毒梭菌C型毒素基因檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、原理
三、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
四、實(shí)驗(yàn)材料和方法
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
六、討論
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第五節(jié)在嗜水氣單胞菌檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、材料
三、方法
四、應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
小結(jié)
第三章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在病毒檢測(cè)中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量RT?PCR在甲型H1N1檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、材料與試劑
四、試驗(yàn)方法
五、結(jié)果判定
六、注意事項(xiàng)
七、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第二節(jié)登革病毒的實(shí)時(shí)熒光定量RT?PCR檢測(cè)
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、材料與試劑
四、操作步驟
五、注意事項(xiàng)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第三節(jié)H5N1亞型高致病性禽流感病毒的實(shí)時(shí)熒光定量RT?PCR檢測(cè)
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、材料與試劑
四、操作步驟
五、試驗(yàn)結(jié)果判定
六、注意事項(xiàng)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第四節(jié)腸道病毒71型的實(shí)時(shí)熒光定量RT?PCR檢測(cè)
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、材料與試劑
四、操作步驟
五、結(jié)果分析
六、注意事項(xiàng)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第五節(jié)多重實(shí)時(shí)熒光定量PCR在呼吸道病毒檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、材料與試劑
四、試驗(yàn)原理與方法
五、結(jié)果判定
六、注意事項(xiàng)
七、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第六節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR用于重組桿狀病毒滴度檢測(cè)的研究
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、材料
四、方法
五、結(jié)果及分析
六、注意事項(xiàng)
七、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第七節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在HIV檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、基本原理
三、試驗(yàn)材料
四、方法
五、試驗(yàn)結(jié)果判定
六、注意事項(xiàng)
七、應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第八節(jié)在檢測(cè)HBV和HCV方面的應(yīng)用
A? 實(shí)時(shí)熒光定量PCR在檢測(cè)HBV方面的應(yīng)用
一、引言
二、材料和方法
三、小結(jié)
B?實(shí)時(shí)熒光定量PCR在檢測(cè)HCV方面的應(yīng)用
一、引言
二、材料和方法
三、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第四章實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)基因突變及臨床應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)基因突變?cè)谶z傳病診斷中的應(yīng)用
一、引言
二、應(yīng)用巢式PCR和TaqMan MGB探針Real?time PCR技術(shù)檢測(cè)經(jīng)典型苯丙酮
尿癥(PKU)
三、應(yīng)用SYBR Green Ⅰ Real?time PCR技術(shù)檢測(cè)慢性骨髓增殖性疾病
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)基因突變?cè)谀[瘤診斷、治療和預(yù)后中的應(yīng)用
一、引言
二、應(yīng)用ASB?PCR方法檢測(cè)Kras基因突變
第三節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)基因突變?cè)谀退幉≡w監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、通過雜交探針實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)臨床分離的結(jié)核分枝桿菌的異煙肼抗性
三、FRET實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測(cè)幽門螺桿菌耐克拉霉素相關(guān)的基因點(diǎn)
突變
本章參考文獻(xiàn)
第五章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在遺傳病研究中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR識(shí)別SNP的方法
一、原理
二、常用的突變識(shí)別方法
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在SNP分型中的應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、試驗(yàn)原理
四、試驗(yàn)材料
五、試驗(yàn)方法
六、結(jié)果與討論
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第三節(jié)等位基因特異性實(shí)時(shí)熒光定量PCR在DNA庫中等位基因定量檢測(cè)中的
應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、試驗(yàn)原理
四、試驗(yàn)材料
五、實(shí)驗(yàn)方法
六、結(jié)果與討論
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第四節(jié)等位基因特異性PCR結(jié)合分子信標(biāo)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在腫瘤和線粒體疾
病檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、試驗(yàn)原理
四、試驗(yàn)材料
五、試驗(yàn)方法
六、結(jié)果與討論
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第六章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在腫瘤中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在腫瘤早期診斷中的意義
方案1Pescadillo在乳腺癌組織中的表達(dá)及其臨床意義
一、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、基本原理
三、實(shí)驗(yàn)材料
四、實(shí)驗(yàn)方法
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
六、小結(jié)
方案2實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)microRNA在不同腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、基本原理
三、材料
四、方法
五、結(jié)果
六、小結(jié)
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在腫瘤預(yù)后評(píng)估中的應(yīng)用
方案1實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)uPA、PAI?1、TIMP?1 mRNA表達(dá)與乳腺癌預(yù)
后的關(guān)系
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、實(shí)驗(yàn)材料
三、實(shí)驗(yàn)方法
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
五、小結(jié)
方案2實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)uPA mRNA表達(dá)在HER2陽性乳腺癌預(yù)后中的
意義
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、實(shí)驗(yàn)材料
三、實(shí)驗(yàn)方法
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
五、小結(jié)
第三節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在藥物療效判斷中的作用
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、材料
三、方法
四、結(jié)果
五、小結(jié)
第四節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在基因表達(dá)調(diào)控中的應(yīng)用
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、實(shí)驗(yàn)材料
三、實(shí)驗(yàn)方法
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
五、小結(jié)
本章參考文獻(xiàn)
第七章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在環(huán)境微生物檢測(cè)中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在檢測(cè)土壤微生物中的應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、原理
四、土壤微生物DNA提取方法匯總
五、操作步驟
六、實(shí)時(shí)熒光定量PCR在土壤中病原菌定量檢測(cè)中的應(yīng)用
七、實(shí)時(shí)熒光定量PCR在土壤中生防菌的動(dòng)態(tài)變化監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR 技術(shù)在空氣微生物檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、試驗(yàn)材料與方法
四、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第三節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在檢測(cè)水源微生物方面的應(yīng)用
一、引言
二、基本原理
三、研究進(jìn)展
四、實(shí)驗(yàn)方法
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
六、結(jié)果分析
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第八章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在動(dòng)物學(xué)研究中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在動(dòng)物感染性疾病監(jiān)測(cè)和檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、原理
三、材料
四、方法與步驟
五、注意事項(xiàng)
六、應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、原理
三、材料
四、方法與步驟
五、注意事項(xiàng)
六、應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第三節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在突變動(dòng)物檢測(cè)和突變品系培育中的應(yīng)用
一、引言
二、SYBR Green Ⅰ實(shí)時(shí)熒光定量PCR在HLA?1502基因檢測(cè)中的應(yīng)用
三、實(shí)時(shí)熒光定量PCR在白化突變鼠檢測(cè)中的應(yīng)用
四、注意事項(xiàng)
五、應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第四節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在藥物效果評(píng)價(jià)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用
一、引言
二、實(shí)時(shí)熒光定量PCR在馬傳染性貧血病毒疫苗效果評(píng)價(jià)中的應(yīng)用
三、利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR評(píng)價(jià)以離子交換色譜純化抗體時(shí)外源病毒因子的清除效果
四、注意事項(xiàng)
五、應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第九章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在基因表達(dá)檢測(cè)和流行病學(xué)中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在分析基因差異表達(dá)中的應(yīng)用
一、實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)和優(yōu)化
二、實(shí)時(shí)熒光定量PCR應(yīng)用實(shí)例
三、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
四、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)CAR基因在小鼠肺發(fā)育不同階段中的表達(dá)
一、引言
二、材料及方法
三、數(shù)據(jù)分析
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第三節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在流行病學(xué)中的應(yīng)用
一、微生物的檢測(cè)和鑒定
二、耐藥分析
三、DNA甲基化、單核苷酸多態(tài)性及突變分析
四、腫瘤基因檢測(cè)
五、基因表達(dá)差異分析
六、微生態(tài)中微生物種的相對(duì)定量
本節(jié)參考文獻(xiàn)
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基礎(chǔ)知識(shí)不錯(cuò)，剩下的就是文獻(xiàn)啦 美中不足 沒有摸索實(shí)驗(yàn)條件的實(shí)驗(yàn)
