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納米醫(yī)學(xué)論文實(shí)用13篇

引論:我們?yōu)槟砹?3篇納米醫(yī)學(xué)論文范文,供您借鑒以豐富您的創(chuàng)作。它們是您寫(xiě)作時(shí)的寶貴資源,期望它們能夠激發(fā)您的創(chuàng)作靈感,讓您的文章更具深度。

篇1

1.2蛋白質(zhì)載體

納米材料在診斷、藥物輸送、生物功能材料、生物傳感器等方面得到了迅猛的發(fā)展,出現(xiàn)了疾病治療、診斷、造影成像等多種功能的組合。無(wú)機(jī)納米材料在生物大分子藥物的載體,包括運(yùn)載蛋白質(zhì)、多肽、DNA和siRNA等方面的研究較多。納米多孔硅有較好的生物相容性、生物可降解性和可調(diào)控的納米粒徑,可作為藥物輸送系統(tǒng)。殼聚糖修飾多孔硅后可用于運(yùn)載口服給藥的胰島素,改善胰島素的跨細(xì)胞滲透,增加與腸道細(xì)胞黏液層的表面接觸,提高細(xì)胞的攝入,可用于口服遞送蛋白質(zhì)和多肽。納米羥基磷灰石與蛋白質(zhì)分子有高親和性,可用作蛋白質(zhì)藥物緩釋載體,能提供鈣離子,造成腫瘤細(xì)胞過(guò)度攝入,從而抑制腫瘤細(xì)胞活性,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。

1.3基因載體

基因治療是遺傳性疾病的臨床治療策略,主要依賴于發(fā)展多樣性的載體。無(wú)機(jī)納米材料用于基因療法是利用無(wú)機(jī)粒子和可生物降解的多聚陽(yáng)離子合成新型的納米藥物載體,如介孔二氧化硅作為基因載體可用于腫瘤治療,促進(jìn)體外siRNA的遞送。乙醛修飾的胱氨酸具有自身熒光的特點(diǎn),可對(duì)pH值和谷胱甘肽進(jìn)行響應(yīng)。通過(guò)熒光標(biāo)記類樹(shù)狀大分子的二氧化硅納米載體具有分級(jí)的孔隙,不僅毒性低、基因裝載率高,轉(zhuǎn)染率也較高。引發(fā)谷胱甘肽二硫鍵裂解,可促進(jìn)質(zhì)粒DNA(pDNA)釋放,并能使用自發(fā)熒光來(lái)實(shí)時(shí)示蹤。又如,通過(guò)π-π共軛、靜電作用等非共價(jià)鍵作用力結(jié)合,能將DNA、RNA等生物大分子和化學(xué)藥物固定在氧化石墨烯上。

1.4骨移植

臨床上可用自體骨移植來(lái)治療創(chuàng)傷、感染、腫瘤等造成的骨缺損,由于骨移植的來(lái)源有限,且手術(shù)時(shí)間長(zhǎng),易導(dǎo)致失血過(guò)多和供骨區(qū)并發(fā)癥等,應(yīng)用受到限制。將異體骨用作骨移植,則存在免疫排斥反應(yīng),且易被感染。而人工骨同自體骨有相近的療效,人工骨材料可采用鈦、生物陶瓷、納米骨、3D模擬人工骨髓等納米材料。例如,納米二氧化硅可替代骨組織,促進(jìn)人工植入材料與肌肉組織融合。納米羥基磷灰石與人體內(nèi)的無(wú)機(jī)成分相似,其粒子有小尺寸效應(yīng)、量子效應(yīng)及表面效應(yīng)等,可用作牙種植體或作為骨骼材料,能避免產(chǎn)生排斥反應(yīng),促進(jìn)血液循環(huán),促進(jìn)人體骨組織的修復(fù)、整合和骨缺損后的治愈。

1.5臨床診斷和治療

磁性氧化鐵納米粒子可作為造影劑用于腫瘤診斷中,對(duì)腫瘤分子產(chǎn)生磁共振分子影像或多模態(tài)腫瘤分子影像,也可用于循環(huán)腫瘤細(xì)胞的分離、富集。免疫磁分離法基于磁性雜化材料可導(dǎo)電,在外部磁場(chǎng)下積累,可用于臨床熱療。磁熱療以磁流體形式進(jìn)入腫瘤組織,利用腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞之間不同的熱敏感度,將外部磁場(chǎng)產(chǎn)生的磁能轉(zhuǎn)化成熱能從而殺死腫瘤細(xì)胞。磁性納米粒子還可用于生物傳感器中,利用磁現(xiàn)象和納米粒子從液相中分離并捕獲生物分子。用綠色熒光蛋白標(biāo)記,形成溫敏的磁性納米固相生物傳感器,用磁性材料制成固相生物傳感器的支架,在磁場(chǎng)作用下,響應(yīng)更快,表面易于更新,可用于免疫診斷。磁性納米氧化鐵作為臨床應(yīng)用的磁性納米材料,受到人們的廣泛關(guān)注。Fe3O4和γ-Fe2O3的特殊磁性質(zhì)使其在靶向腫瘤藥物載體、磁療、熱療、核磁共振成像、生物分離等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中得以應(yīng)用。用無(wú)機(jī)納米材料制作激發(fā)熒光探針進(jìn)行臨床診斷,如用介孔二氧化硅制成的細(xì)胞熒光成像探針利用量子點(diǎn)良好的光穩(wěn)定性、較長(zhǎng)的熒光壽命和較高的生物相容性,結(jié)合介孔二氧化硅可特異性地識(shí)別Ramos細(xì)胞的特點(diǎn),并用激光共聚焦顯微鏡對(duì)Ramos細(xì)胞進(jìn)行熒光成像,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的早期診斷、檢測(cè)成像。富勒烯特殊的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)使其可以廣泛地應(yīng)用于光熱治療、輻射化療、癌癥治療等醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,也可作為核磁共振成像的造影劑用于臨床診斷。但富勒烯不溶于水,對(duì)生物體存在潛在的毒性,限制了其在臨床的應(yīng)用。富勒烯結(jié)合含羥基的親水性分子可改善其溶解性,羥基化富勒烯無(wú)明顯毒性,可作為抗氧化劑。聚羥基富勒烯利用近紅外光激活體內(nèi)的納米材料,用光熱對(duì)腫瘤細(xì)胞定位,避免了金納米粒子、碳納米管等在體內(nèi)造成聚積,利用免疫刺激作用來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、生長(zhǎng),從而減小腫瘤的尺寸,最終造成腫瘤細(xì)胞凋亡。因此,改造碳納米結(jié)構(gòu),在成像、吸附、藥物裝載與靶向運(yùn)輸?shù)壬镝t(yī)學(xué)工程方面有潛在的應(yīng)用價(jià)值。銀納米粒子殺菌活性遠(yuǎn)高于銀離子,在殺菌抑菌方面得到廣泛的應(yīng)用,可用于外科手術(shù)中的傷口愈合、藥學(xué)、生命科學(xué)等生物和臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。金納米粒子有較好的生物相容性,功能化的金納米粒子可用于生物分析、藥物檢測(cè)、臨床診斷等生物醫(yī)藥領(lǐng)域,可作為納米探針檢測(cè)重金屬離子、三聚氰胺等小分子,也可檢測(cè)DNA、蛋白質(zhì)等生物大分子,還可以用于對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)部的多糖、核酸、多肽等的精確定位。鎳納米粒子固定在海藻酸水凝膠中,通過(guò)熱敏感粒子與鎳磁納米粒子交聯(lián)形成囊狀結(jié)構(gòu),組成熱磁雙敏感的磁性納米粒子。在交變磁場(chǎng)下緩慢釋放水凝膠中的鎳納米粒子,通過(guò)遠(yuǎn)程調(diào)控來(lái)激發(fā)水凝膠中成纖維細(xì)胞的凋亡。無(wú)機(jī)納米材料的類別不同,在尺寸、形貌上有很大的變動(dòng)范圍,因其核心材料的量子特性,已日益成為涉及臨床診斷、成像和治療的手段,為納米材料在生物醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用提供更多的可能。

2展望

納米技術(shù)作為新時(shí)代的疾病治療模式,為未來(lái)的臨床用藥提供了新的可能,在生物醫(yī)學(xué)的應(yīng)用上有很大的前景。目前,癌癥治療主要包括手術(shù)、放療和化療等手段,而藥物劑量增多會(huì)造成副作用。納米粒子可以作為靶向藥物載體、成像造影劑、化療、熱療、磁療系統(tǒng),可通過(guò)血腦屏障,在治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病中有很大的潛力,有望成為攻克癌癥的新手段。無(wú)機(jī)納米材料在藥物載體、臨床診斷和治療等方面有廣闊的應(yīng)用前景,但目前的研究大多處于實(shí)驗(yàn)階段。無(wú)機(jī)納米材料在生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用中有待解決的問(wèn)題包括:

(1)提高疾病治療的針對(duì)性、靶向性和可調(diào)控性;

(2)使無(wú)機(jī)納米材料相對(duì)固定在腫瘤細(xì)胞表面,不至于擴(kuò)散到正常組織,從而提高腫瘤部位的有效濃度,減少毒副作用;

(3)納米材料有潛在的毒性,可降低納米材料的毒副作用以達(dá)到臨床應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn);

(4)尋找優(yōu)質(zhì)材料,優(yōu)化結(jié)構(gòu),提高材料的生物相容性、生物安全性,并針對(duì)不同的藥物溶解性設(shè)計(jì)特定的載體和功能材料骨架,增加細(xì)胞的攝取和利用;

篇2

1 醫(yī)學(xué)生首先應(yīng)了解醫(yī)學(xué)科研的概念及分類

科學(xué)是知識(shí)和學(xué) 問(wèn)之意,是在一定社會(huì)環(huán)境中對(duì)知識(shí)的探求,而醫(yī)學(xué)是科學(xué)的分支,是一門古老的科學(xué)。醫(yī) 學(xué)作為一種認(rèn)識(shí)現(xiàn)象,是一種特殊的社會(huì)意識(shí)形式,是關(guān)于人體正常和異常的生命過(guò)程以及 同疾病作斗爭(zhēng)和增進(jìn)健康的科學(xué)知識(shí)體系,是人類長(zhǎng)期與疾病作斗爭(zhēng)的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)。醫(yī) 學(xué)研究是一種自然現(xiàn)象,它研究對(duì)象是人,它主要研究人體生命過(guò)程及其與外界環(huán)境的相互 關(guān)系規(guī)律,研究人體疾病的發(fā)生、發(fā)展、痊愈及其防治的規(guī)律,研究增進(jìn)人類健康、延長(zhǎng)人 類壽命和提高勞動(dòng)能力的有效措施。根據(jù)研究對(duì)象、內(nèi)容和方法的不同,把醫(yī)學(xué)科學(xué)分為基 礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和預(yù)防醫(yī)學(xué)。基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)是研究人體的生命活動(dòng)和作用于人體的致病因子、 藥物、毒物以及疾病發(fā)生發(fā)展的本質(zhì)和普遍規(guī)律的科學(xué)體系,是整個(gè)醫(yī)學(xué)發(fā)展的基礎(chǔ)和先導(dǎo) 。臨床醫(yī)學(xué)是研究認(rèn)識(shí)疾病和治療疾病的科學(xué)體系,是醫(yī)學(xué)中的技術(shù)科學(xué)和應(yīng)用科學(xué)的龐大 體系。預(yù)防醫(yī)學(xué)是研究預(yù)防和消除病害、講究衛(wèi)生、增強(qiáng)體質(zhì)、改善和創(chuàng)造有利于健康的生 產(chǎn)環(huán)境和生活條件的科學(xué)體系。以上的分類不是固定不變的,它將隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展而發(fā)展。 傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)分類已經(jīng)不能充分地概括醫(yī)學(xué)領(lǐng)域各分支學(xué)科的現(xiàn)狀和全貌。基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī) 學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)三者相對(duì)獨(dú)立的傳統(tǒng)界線會(huì)日益模糊,三者之間相互滲透,漸趨融合,各種新 的學(xué)科分支不斷產(chǎn)生。

2 醫(yī)學(xué)科學(xué)研究促進(jìn)了醫(yī)學(xué)的發(fā)展

隨著社會(huì)的發(fā)展,科學(xué)在社會(huì)中地位越來(lái)越重要,醫(yī)學(xué)作為科學(xué)一個(gè)分支也如此。20世紀(jì)以 來(lái),現(xiàn)代醫(yī)學(xué)以空前的速度向前發(fā)展,為保障人類的生命和健康作出了重大貢獻(xiàn)。未來(lái)醫(yī)學(xué) 發(fā)展前景如何?人類將遇到哪些困擾?將采取何種對(duì)策去迎接未來(lái)的挑戰(zhàn)。這就需要醫(yī)學(xué)院 校的學(xué)生打下扎實(shí)的科研基礎(chǔ)去面對(duì)。

2.1 近代醫(yī)學(xué)研究的發(fā)展

醫(yī)學(xué)的產(chǎn)生已有4000多年,早在文藝復(fù)興時(shí)代,比利時(shí)醫(yī)生維薩里就明確宣言:“我要以人 體本身上的解剖來(lái)闡明人體的構(gòu)造。”他還認(rèn)為科學(xué)不應(yīng)該盲從,必須從實(shí)際出發(fā),因此不 顧教會(huì)不準(zhǔn)解剖尸體的禁令,夜間從刑場(chǎng)偷回尸體,從事人體解剖的研究。1543年,維薩里 發(fā)表了《人體的構(gòu)造》,奠定了人體解剖學(xué)的基礎(chǔ)。1628年,英國(guó)醫(yī)生哈維在活體實(shí)驗(yàn)的直 接觀察的基礎(chǔ)上,發(fā)表了《論動(dòng)物的心臟運(yùn)動(dòng)與血液運(yùn)動(dòng)》,把生理學(xué)確立為科學(xué)。自此人 們由認(rèn)識(shí)人體的結(jié)構(gòu)形態(tài)進(jìn)而認(rèn)識(shí)活體的生理功能,開(kāi)始了近代醫(yī)學(xué)的新時(shí)代。

18、19世紀(jì),近代醫(yī)學(xué)取得了巨大進(jìn)展,主要標(biāo)志為實(shí)驗(yàn)生理學(xué)的發(fā)展,細(xì)胞病理學(xué)的 建立,科學(xué)的微生物學(xué)說(shuō)的興起。近代醫(yī)學(xué)研究均以實(shí)驗(yàn)觀察為基礎(chǔ),用實(shí)驗(yàn)中觀察到的事 實(shí)來(lái)做結(jié)論。它們的特點(diǎn)為:分門別類,各自孤立的研究,由于分門別類的研究,積累了許 多新的事實(shí),引起了近代醫(yī)學(xué)進(jìn)一步分化。例如比較生理學(xué)、病理生理學(xué)、病理解剖學(xué)、胚 胎學(xué)、微生物學(xué)等,都形成了獨(dú)立的學(xué)科。

2.2 新世紀(jì)當(dāng)代醫(yī)學(xué)研究的發(fā)展

二十世紀(jì)當(dāng)代醫(yī)學(xué)發(fā)展的特點(diǎn)是人們的認(rèn)識(shí)向微觀的深入和宏觀上的擴(kuò)展,自然科學(xué)分科的 進(jìn)一步發(fā)展,互相錯(cuò)綜,形成一個(gè)網(wǎng)絡(luò)式的整體系統(tǒng)。醫(yī)學(xué)科學(xué)也隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的重大 成就,發(fā)生了巨大的變化,從而形成了新的歷史特點(diǎn)。當(dāng)代醫(yī)學(xué)科學(xué)發(fā)展具有既高度分化又 高度綜合的新特點(diǎn),有力地表明了醫(yī)學(xué)研究既是多樣的,又是統(tǒng)一的。馬克思早就指出了科 學(xué)統(tǒng)一的前景,他說(shuō):“自然科學(xué)往后將包括關(guān)于人的科學(xué),正像關(guān)于人的科學(xué)將包括自然 科學(xué)一樣,這將是一門科學(xué)”[1]。

醫(yī)學(xué)的分化趨勢(shì)與整體化趨勢(shì):①新技術(shù)提供現(xiàn)代化研究手段,對(duì)人體和疾病的研究達(dá)到分 子水平,正向量子水平前進(jìn)。這就促進(jìn)了學(xué)科的高度分化,例如,當(dāng)今的遺傳學(xué)就發(fā)展了許 多分支,諸如:毒理遺傳、免疫、生態(tài)、行為遺傳學(xué)等。傳統(tǒng)外科也出現(xiàn)了許多分支,例如 :普外、胸外、腦外、顯微外、移植外、整形外等。②整體化趨勢(shì)主要表現(xiàn)為臨床與基礎(chǔ)的 統(tǒng)一,預(yù)防與臨床、基礎(chǔ)的統(tǒng)一,例如:環(huán)境醫(yī)學(xué)、人體力學(xué),生物材料學(xué)等。大生物學(xué)的 誕生就是當(dāng)代醫(yī)學(xué)高度整體化的重要標(biāo)志,它是把地球上所有以生物為研究對(duì)象或研究材料 的學(xué)科集合起來(lái),對(duì)比它們的特性、相互關(guān)系及其地球環(huán)境對(duì)它們的影響。如地球溫室效應(yīng) 、厄爾尼諾現(xiàn)象等。此外,中西醫(yī)理論上的結(jié)合也變成可能。西方醫(yī)學(xué)的成功是分析方法和 手段的勝利。而它的缺點(diǎn)主要是缺少整體觀與系統(tǒng)論造成的。西醫(yī)向更高層次的發(fā)展,將是 在實(shí)證科學(xué)的基礎(chǔ)上,吸收系統(tǒng)與整體論的觀點(diǎn),走向生命現(xiàn)象的復(fù)雜系統(tǒng)論。這就是生物 模式向“環(huán)境-社會(huì)-心理-生物”模式轉(zhuǎn)變的基礎(chǔ),也為中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)與西方現(xiàn)代醫(yī)學(xué)在更 高層次的結(jié)合、創(chuàng)立“統(tǒng)一醫(yī)學(xué)”提供了可能性[2]。

總之,新世紀(jì)的醫(yī)學(xué)科研正向兩極方向高度發(fā)展,一方面向細(xì)胞分子、量子、納米生物學(xué)深 入。另一方面,則向有關(guān)種群生態(tài)及生物圈的研究領(lǐng)域展開(kāi)。學(xué)生必須從這些醫(yī)學(xué)科研導(dǎo)論 中理解這些前瞻性知識(shí)對(duì)將來(lái)醫(yī)學(xué)臨床和科研的重要性,增加對(duì)醫(yī)學(xué)的興趣和作為醫(yī)生的責(zé) 任感。新世紀(jì)醫(yī)學(xué)的任務(wù)將從以防病治病為主逐步轉(zhuǎn)向以維護(hù)和增強(qiáng)健康,提高人的生命質(zhì) 量為主,未來(lái)尋求醫(yī)學(xué)服務(wù)的不僅是患者,還有相當(dāng)數(shù)量的正常人。尋醫(yī)問(wèn)診的不僅是身體 缺欠,更多的是得到生活指導(dǎo)和心理咨詢,醫(yī)生開(kāi)出的不僅是藥方還有生活處方。

3 研究方法

科學(xué)研究是以研究自然界物質(zhì)運(yùn)動(dòng)規(guī)律為直接目的的,在實(shí)驗(yàn)中,人們可以根據(jù)科學(xué)研究的 目的和要求,借助一些特定的儀器和設(shè)備,造成在研究中某些對(duì)象所需要的特殊條件,控制 某些因素或排除一些不利因素,把要研究的問(wèn)題進(jìn)行精細(xì)地、反復(fù)地觀察和研究,最后得出 科學(xué)結(jié)論。科學(xué)研究史的無(wú)數(shù)事例說(shuō)明,科學(xué)研究已經(jīng)成為科學(xué)知識(shí)新的源泉。醫(yī)學(xué)院校學(xué) 生需要掌握以下幾方面科研基礎(chǔ)知識(shí)和研究方法。

3.1 醫(yī)學(xué)研究的特點(diǎn)

醫(yī)學(xué)研究是認(rèn)識(shí)疾病,掌握它的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程,提示健康與疾病的轉(zhuǎn)化規(guī)律。因研究的對(duì) 象為人體本身,故在形態(tài)學(xué)、生理學(xué)具有生物學(xué)屬性外,在語(yǔ)言、思維和社會(huì)生活上又具有 社會(huì)屬性,因此人體現(xiàn)象不能籠統(tǒng)用一般生物學(xué)規(guī)律來(lái)解釋。另外,許多醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)和觀察不 允許按研究者的意愿在人體上直接試驗(yàn)。

3.2 掌握醫(yī)學(xué)科研的基本程序

①問(wèn)題提出:愛(ài)因斯坦曾說(shuō)“提出一個(gè)問(wèn)題往往比解決一個(gè)問(wèn)題更為重要,因?yàn)榻?決一個(gè)問(wèn)題也許是一個(gè)數(shù)學(xué)上或?qū)嶒?yàn)上的技巧。而提出新的問(wèn)題,新的可能性,從新的角度 看舊問(wèn)題,卻需要?jiǎng)?chuàng)造性的想象力,而標(biāo)志著科學(xué)的真正進(jìn)步”。可見(jiàn),提出科學(xué)問(wèn)題,尤 其是提出概念清晰的難題,更能對(duì)科學(xué)進(jìn)步起到真正的推動(dòng)作用。因此,學(xué)生應(yīng)培養(yǎng)善于觀 察、發(fā)現(xiàn)問(wèn)題的好習(xí)慣。②假說(shuō)建立與驗(yàn)證:根據(jù)經(jīng)驗(yàn)和知識(shí),包括文獻(xiàn)、大體分析對(duì)象的 內(nèi)部聯(lián)系,提出對(duì)該問(wèn)題的可能答案或解釋,這種預(yù)先答案叫假說(shuō)。進(jìn)行醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)或臨床實(shí) 驗(yàn)均需先提出假說(shuō),然后通過(guò)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、觀察、統(tǒng)計(jì)等來(lái)對(duì)假說(shuō)進(jìn)行驗(yàn)證。③結(jié)論與資料解 釋:此為科研中更深刻、更有理論和實(shí)踐意義的部分。對(duì)在實(shí)驗(yàn)和臨床研究過(guò)程中收集的大 量資料和數(shù)據(jù)進(jìn)行科學(xué)的整理和處理,也就是對(duì)臨床觀察的素材進(jìn)行科學(xué)加工,對(duì)大量數(shù)據(jù) 資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,以便為分析判斷,得出科學(xué)的結(jié)論做好準(zhǔn)備。④形成:醫(yī)學(xué)論 文是醫(yī)學(xué)研究的一個(gè)重要組成部分,完備的醫(yī)學(xué)論文應(yīng)具有學(xué)術(shù)性、科學(xué)性和創(chuàng)新性。

3.3 需掌握科研課題的選定

3.3.1 掌握選題的基本要求 ①要有科學(xué)性:表現(xiàn)為科研設(shè)計(jì)是否嚴(yán)密、合理 ,研究方法是否正確、完善等。②要有創(chuàng)新性:科研忌無(wú)意義重復(fù)前人的工作。選題的創(chuàng)新 表現(xiàn)在研究方法、設(shè)計(jì)是否在前人的基礎(chǔ)上有所改進(jìn)、提高和創(chuàng)新。③具體明確:醫(yī)學(xué)研究 的選題必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的核對(duì)、分析,真實(shí)明確地反映客觀存在的事實(shí)。對(duì)題目的選定要明確 ,不能含糊不清。④適當(dāng)實(shí)施手段:慎重考慮本人技術(shù)水平和所在單位的設(shè)備狀況,不能脫 離本人和單位具體情況。

3.3.2 需掌握選題的種類 醫(yī)學(xué)科研選題分為:①調(diào)查研究:流行病學(xué)、衛(wèi)生 學(xué)。②實(shí)驗(yàn)觀察:生理學(xué)、藥理學(xué),需要實(shí)驗(yàn)條件和觀察手段。③資料分析:需要既往的醫(yī) 療衛(wèi)生資料,統(tǒng)計(jì)分析,如死因分析等。④經(jīng)驗(yàn)體會(huì):在自己的研究基礎(chǔ)上著重對(duì)某一問(wèn)題 進(jìn)行探討。總之,科學(xué)研究是醫(yī)學(xué)工作者的重要工作之一,然而,有關(guān)的科研方法在醫(yī)學(xué)院校教育中較 少涉及,僅在研究生培養(yǎng)過(guò)程中作為一般內(nèi)容簡(jiǎn)要介紹。因此,許多醫(yī)學(xué)本科生畢業(yè)后不知 怎樣進(jìn)行科學(xué)研究。2000年《中華外科學(xué)雜志》的退稿率為74.49%,退稿稿件中科研方法不 正確者占76.25%[3]。表明在醫(yī)學(xué)科研工作中,科研方法的不合理應(yīng)用已成為一種 普遍現(xiàn)象。要彌補(bǔ)醫(yī)學(xué)工作者的這一缺陷,必須加強(qiáng)在校醫(yī)學(xué)生的醫(yī)學(xué)科研能力的培養(yǎng)。開(kāi) 設(shè)醫(yī)學(xué)科研導(dǎo)論課程就是其中一個(gè)重要的環(huán)節(jié),應(yīng)引起各類醫(yī)學(xué)院校的重視。

參考文獻(xiàn):

[1] 馬克思,恩格斯全集.經(jīng)濟(jì)學(xué)哲學(xué)手稿[M].1844,42:128.

篇3

1 標(biāo)準(zhǔn)法的改進(jìn)

1.1 消解方法的改進(jìn)

為縮短傳統(tǒng)的回流消解時(shí)間,早期進(jìn)行的工作包括密封消解法、快速開(kāi)管消解法、替代催化劑的選擇等;近期的工作主要包括采用微波消解法、聲化學(xué)消解法、光催化氧化法等新技術(shù)。

1.1.1替代催化劑的研究 重鉻酸鉀法所用的催化劑Ag2 SO4 價(jià)格昂貴,分析成本高。因此,畢業(yè)論文研究Ag2 SO4 的替代物,以求降低分析費(fèi)用有一定的實(shí)用性。如以MnSO4 代替Ag2 SO4 是可行的,但回流時(shí)間仍較長(zhǎng)。Ce ( SO4 ) 2 與過(guò)渡金屬混合顯示出很好的協(xié)同催化效應(yīng),如以MnSO4 - Ce ( SO4 ) 2復(fù)合催化劑代替Ag2 SO4[ 1 ] ,測(cè)定廢水COD,不但可降低測(cè)定費(fèi)用,還可降低溶液酸度和縮短分析時(shí)間,與重鉻酸鉀法無(wú)顯著差異。

1.1.2微波消解法 如微波消解無(wú)汞鹽光度法測(cè)定COD;微波消解光度法快速測(cè)定COD;無(wú)需使用HgSO4 和Ag2 SO4 測(cè)定COD 的微波消解法;氧化鉺作催化劑微波消解測(cè)定生活污水COD 等。Ramon[ 2 ]等采用聚焦微波加熱常壓下快速消解測(cè)定COD。

與標(biāo)準(zhǔn)回流法相比,微波消解時(shí)間從2h縮短到約10min,且消解時(shí)無(wú)需回流冷卻用水,耗電少,試劑用量大大降低,一次可完成12 個(gè)樣品的消解,減輕了銀鹽、汞鹽、鉻鹽造成的二次污染[ 3 ] 。專著[ 4 ]對(duì)此作了較全面的總結(jié)。

1.1.3聲化學(xué)消解法 盡管微波消解時(shí)間短,但消解完后要等消解罐冷卻至室溫仍需一定時(shí)間。而超聲波消解方便,設(shè)備簡(jiǎn)單,且不受污染物種類及濃度的限制,近年來(lái)已有一些應(yīng)用研究[ 5 ] 。鐘愛(ài)國(guó)[ 6 ]使用自制的聲化學(xué)反應(yīng)器對(duì)不同水樣進(jìn)行了聲化學(xué)消解試驗(yàn),提高了分析效率,減少了化學(xué)試劑用量, COD 測(cè)定范圍150mg ·L - 1 ~ 2000mg·L - 1 ,標(biāo)準(zhǔn)偏差≤615% ,加標(biāo)回收率96% ~120%。超聲波消解時(shí),超聲波輻射頻率和聲強(qiáng)是兩個(gè)重要的影響因素。試驗(yàn)表明,超聲波輻射標(biāo)準(zhǔn)水樣30min 時(shí), 低頻( 20kHz) 、適當(dāng)高的聲強(qiáng)(80W·cm- 2 )有利于水樣的完全消化。

1.1.4光催化氧化法 紫外光氧化快速、高效,在常溫常壓下進(jìn)行,不產(chǎn)生二次污染,因此對(duì)水和廢水分析的優(yōu)勢(shì)特別突出。近幾年來(lái),半導(dǎo)體納米材料作為催化劑消除水中有機(jī)污染物的方法已引起了人們的廣泛關(guān)注。當(dāng)用能量等于或大于半導(dǎo)體禁帶寬度(312eV)的光照射半導(dǎo)體時(shí),可使半導(dǎo)體表面吸附的羥基或水氧化生成強(qiáng)氧化能力的羥基自由基( ·OH) ,從而使水中的有機(jī)污染物氧化分解。艾仕云等[ 7 ]提出納米ZnO 和KMnO4協(xié)同氧化體系,并據(jù)此建立了測(cè)定COD 的方法,所得結(jié)果的可靠性和重現(xiàn)性與標(biāo)準(zhǔn)法相當(dāng)。他們還使用K2 Cr2O7 氧化劑、納米TiO2 光催化劑測(cè)定COD[ 8 ] 。通過(guò)光催化還原K2 Cr2O7 生成的Cr3 +濃度變化,可以獲得樣品的COD值。但反應(yīng)仍需恒溫?cái)嚢瑁磻?yīng)液需離心過(guò)濾。操作煩瑣,且不能在線快速分析。

1.2 測(cè)定方法的改進(jìn)

1. 2. 1分光光度法 分光光度法測(cè)定COD是在強(qiáng)酸性溶液中過(guò)量重鉻酸鉀氧化水中還原性物質(zhì), Cr6 +還原為Cr3 + ,英語(yǔ)論文利用分光光度計(jì)測(cè)定Cr6 +或Cr3 +來(lái)實(shí)現(xiàn)COD 值測(cè)定。Inaga 等以Ce ( SO4 ) 2作氧化劑,加熱反應(yīng)后測(cè)定吸光度,計(jì)算出COD值。Konno使用自制的比色計(jì)與PC機(jī)相聯(lián)測(cè)定COD,所得結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)法基本一致。光度法測(cè)得COD值快速、準(zhǔn)確、成本低等。目前,國(guó)內(nèi)外不少COD快速測(cè)定儀均是基于光度法原理。如美國(guó)HACH公司制造的COD測(cè)定儀是美國(guó)國(guó)家環(huán)保局認(rèn)可的COD測(cè)量方法。

1. 2. 2電化學(xué)分析法

(1)庫(kù)侖法 庫(kù)侖法是我國(guó)測(cè)定COD的推薦方法,該法利用電解產(chǎn)業(yè)的亞鐵離子作庫(kù)侖滴定劑進(jìn)行庫(kù)侖滴定, 根據(jù)消耗的電量求得剩余K2 Cr2O7 量,從而計(jì)算出COD。廣州怡文科技有限公司和中國(guó)環(huán)境監(jiān)測(cè)總站研制的EST22001COD在線自動(dòng)監(jiān)測(cè)儀,采用庫(kù)侖滴定原理,測(cè)量范圍5mg/L~1000mg/L;測(cè)量時(shí)間30min~60min,測(cè)量誤差≤±5% FS;重復(fù)誤差≤±3%FS,與手動(dòng)分析具有很好的相關(guān)性。

(2)電解法 此法既不外加氧化劑,也不加熱消解水樣,而是利用電化學(xué)原理直接測(cè)量水中有機(jī)物的含量,是COD測(cè)定方法的突破。方法原理基于特殊電極電解產(chǎn)生的羥基自由基( ·OH)具有很強(qiáng)的氧化能力,可同步迅速氧化水中有機(jī)物,較難氧化的物質(zhì)(如煙酸、吡啶等)也均能被·OH氧化。羥基自由基被消耗的同時(shí),工作電極上電流將產(chǎn)生變化。當(dāng)工作電極電位恒定時(shí),電流的變化與水中有機(jī)物的含量成正比關(guān)系,通過(guò)計(jì)算電流變化便可測(cè)量出COD 值。作者在這方面作了一些探索工作,取得了初步的結(jié)果[ 9, 10 ] 。由于水樣不需消解,極大縮短了分析流程,還克服了傳統(tǒng)方法中“二次污染”的問(wèn)題。目前,這類儀器代表產(chǎn)品是德國(guó)LAR公司的Elox100A型COD在線自動(dòng)監(jiān)測(cè)儀h[ 11 ] 。儀器測(cè)量范圍從1mg/L~10000mg/L,最大可到100000mg/L,測(cè)量周期2min~6min。此儀器在歐美各國(guó)已得到較廣泛的應(yīng)用,在我國(guó)也獲得國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢疫總局計(jì)量器具型式批準(zhǔn)證書(shū)。

(3)其他電化學(xué)分析法 Dugin[ 12 ]提出以Ce( SO4 ) 2 為氧化劑,利用pH電極和氧化還原電極直接測(cè)定電勢(shì)從而測(cè)定COD 值的方法。Belius2tiu[ 13 ]以兩種不同的玻璃電極組成電池,通過(guò)直接測(cè)定電池電動(dòng)勢(shì), 對(duì)水樣中COD值進(jìn)行測(cè)定。趙亞乾[ 14 ]以一定比例的反應(yīng)溶液回流10min后,冷卻稀釋,用示波器指示終點(diǎn)進(jìn)行示波電位滴定測(cè)定COD。

Westbroek等[ 15 ]提出Pt - Pt/PbO2 旋轉(zhuǎn)環(huán)形圓盤(pán)電極多脈沖電流分析法,通過(guò)電化學(xué)方法產(chǎn)生強(qiáng)氧化劑,碩士論文有機(jī)污染物在圓盤(pán)電極表面直接氧化或與產(chǎn)生的氧化物質(zhì)反應(yīng)而間接被轉(zhuǎn)化。伏安計(jì)時(shí)電流法和多脈沖計(jì)時(shí)電流法測(cè)COD,可在幾秒中獲得結(jié)果,而且可以在線監(jiān)測(cè)。形成的強(qiáng)氧化媒介可使工作電極表面保持清潔。但方法檢測(cè)限較高,不適合地表水或輕度污染水的測(cè)定。但德忠等[ 16 ]提出混合酸消解和單掃描極譜法快速測(cè)COD 的方法。該法基于用單掃描極譜法測(cè)定混合酸(H3 PO4 - H2 SO4 )消解體系中過(guò)量的Cr6 + ,從而間接測(cè)定COD。混合酸消解回流時(shí)間只需15min。Venkata等[ 17 ]使用示差脈沖陽(yáng)極溶出伏安法(DPASV)進(jìn)行電化學(xué)配位滴定確定有機(jī)金屬絡(luò)合物的絡(luò)合能力,從而測(cè)定COD。

1.2.3化學(xué)發(fā)光法 根據(jù)重鉻酸鉀消解廢水后其最終還原產(chǎn)物Cr3 +濃度與COD值成正比關(guān)系,以及在堿性條件下, Luminol - H2O2 - Cr3 +體系產(chǎn)生很強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光的原理,文獻(xiàn)[ 18, 19 ]提出一種用光電二極管做檢測(cè)器測(cè)定水體化學(xué)需氧量的新方法。

1.2.4紫外吸收光譜法 紫外吸收光譜法是通過(guò)測(cè)量水樣中有機(jī)物的紫外吸收光譜(一般用254nm波長(zhǎng)) ,直接測(cè)定COD。已有工作表明,不少有機(jī)物在紫外光譜區(qū)有很強(qiáng)的吸收,在一定的條件下有機(jī)物的吸光度與COD 有相關(guān)性,利用這種相關(guān)性可直接測(cè)定COD。這種方法不像COD、總有機(jī)碳( TOC)方法那樣明確,但在特定水體中有極高的相關(guān)性,也能真實(shí)反映有機(jī)物含量。基于紫外吸收原理測(cè)定COD 的儀器已有生產(chǎn)。這類方法均不需添加任何試劑、無(wú)二次污染、快速簡(jiǎn)單,但前提條件是水質(zhì)組成必須相對(duì)穩(wěn)定。此方法在日本已是標(biāo)準(zhǔn)方法,但在歐美各國(guó)尚未推廣應(yīng)用,在我國(guó)尚需開(kāi)展相關(guān)的研究。

2 自動(dòng)在線分析技術(shù)

流動(dòng)分析( FA)用于水樣COD的測(cè)定可將樣品消解和測(cè)定實(shí)現(xiàn)一體化,留學(xué)生論文使整個(gè)過(guò)程實(shí)現(xiàn)在線化、自動(dòng)化。Korinaga[ 20 ]提出以Ce ( SO4 ) 2 為氧化劑,采用空氣整段間隔連續(xù)流動(dòng)分析法對(duì)環(huán)境水樣中的COD進(jìn)行測(cè)定,采樣頻率達(dá)90次/h,但需特制的閥,且管長(zhǎng)達(dá)18m。陳曉青等[ 21 ]提出測(cè)定COD的流動(dòng)注射停流法,系統(tǒng)以微機(jī)控制蠕動(dòng)泵的啟停,并記錄分光光度計(jì)檢測(cè)到的信號(hào)。由于停流技術(shù)的引入,解決了慢反應(yīng)中樣品的過(guò)度分散問(wèn)題。

Cuesta等[ 22 ]提出COD的微波消解火焰原子吸收光譜- 流動(dòng)注射分析法。用微波加熱消解樣品,未被樣品中有機(jī)物質(zhì)還原的Cr6 +保留在陰離子交換樹(shù)脂上, Cr6 +經(jīng)洗脫后用火焰原子吸收光譜法測(cè)定。這種方法在檢測(cè)中沒(méi)有基體效應(yīng)的影響。

盡管流動(dòng)注射分析的優(yōu)勢(shì)突出,但仍免不了傳統(tǒng)加熱方式。為了提高在線消解效率,不得不加長(zhǎng)反應(yīng)管或采用停留技術(shù),這又導(dǎo)致分析周期延長(zhǎng)或低的采樣頻率。醫(yī)學(xué)論文微波在線消解效果雖好,但去除產(chǎn)生的氣泡使流路結(jié)構(gòu)復(fù)雜化。但德忠等[ 23 ]將流動(dòng)注射和紫外光氧化技術(shù)引入高錳酸鹽指數(shù)的測(cè)定中,建立了紫外光催化氧化分光光度法測(cè)定高錳酸鹽指數(shù)的流動(dòng)分析體系,并對(duì)多種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(葡萄糖、鄰苯二甲酸氫鉀、草酸鈉等)進(jìn)行了研究,反應(yīng)僅需約115min,回收率8310%~11110%,檢測(cè)限為016mg/L。用此方法成功測(cè)定了COD質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)(QCSPEX - PEM - WP)和英格蘭普利茅斯Tamar河水樣品。

Yoon - Chang[ 24 ]將光催化劑二氧化鈦鋪助紫外光消解與流動(dòng)分析技術(shù)聯(lián)用測(cè)定化學(xué)耗氧量,獲得了好的相關(guān)性。李保新等[ 25 ]把化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)和流動(dòng)分析法結(jié)合測(cè)定高錳酸鹽指數(shù),有機(jī)物在室溫條件下發(fā)生化學(xué)氧化反應(yīng), KMnO4 還原為Mn2 +并吸附在強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂微型柱上,同時(shí)過(guò)量的MnO-

4 通過(guò)微型柱廢棄。吸附在微型

柱上的Mn2 + 被洗脫出來(lái)使用H2O2 發(fā)光體系檢測(cè)。若換用職稱論文重鉻酸鐘氧化劑,在酸性條件下,重鉻酸鉀還原生成的Cr ( Ⅲ)催化Luminol - H2O2 體系產(chǎn)生強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光可測(cè)定COD。該方法已用于地表水樣COD的測(cè)定。

基于流動(dòng)技術(shù),綜合電化學(xué)技術(shù)、現(xiàn)代傳感技術(shù)、自動(dòng)測(cè)量技術(shù)、自動(dòng)控制技術(shù)、計(jì)算機(jī)應(yīng)用技術(shù)、現(xiàn)代光機(jī)電技術(shù)研制的COD 在線監(jiān)測(cè)儀,一般包括進(jìn)樣系統(tǒng)、反應(yīng)系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、控制系統(tǒng)四部分。進(jìn)樣系統(tǒng)由輸液泵、定量管、電磁閥、管路、接口等組成,完成對(duì)水樣的采集、輸送、試劑混合、廢液排除及反應(yīng)室清洗等功能;反應(yīng)系統(tǒng)主要有加熱單元或(和)反應(yīng)室,完成水樣的消解和的反應(yīng);檢測(cè)系統(tǒng)包括單片機(jī)(或工控機(jī)) 、時(shí)序控制和數(shù)據(jù)處理軟件、鍵盤(pán)和顯示屏等,完成在線全過(guò)程的控制、數(shù)據(jù)采集與處理、顯示、儲(chǔ)存及打印輸 參考文獻(xiàn)

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篇4

一、材料與方法

1、材料伊格爾最低濃度必需介質(zhì)(EMEM)培養(yǎng)基(美國(guó)Gibco),胎牛血清(FCS,美國(guó)Hyclone),胰酶(美國(guó)Sig-ma),PKH26及PKH67(美國(guó)Sigma),Hoechst33342(美國(guó)Sigma)。JSM—6000F掃描電鏡(日本JEOL公司)。腎小管上皮細(xì)胞(HKC)由南京醫(yī)科大學(xué)楊俊偉教授饋贈(zèng),血管內(nèi)皮細(xì)胞(ECV304)由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院三所細(xì)胞室贈(zèng)送,轉(zhuǎn)染種子細(xì)胞的rAAV2-hNanog重組病毒由北京本元正陽(yáng)生物技術(shù)公司包裝完成,轉(zhuǎn)染rAAV2-hNanog重組病毒的2種細(xì)胞ECV304、HKC由本實(shí)驗(yàn)室制備并保存。

2、中空纖維上混合細(xì)胞的分布

2.1混合細(xì)胞的PKH26/PKH67標(biāo)記:將轉(zhuǎn)染hNanog基因的兩種細(xì)胞ECV304及HKC細(xì)胞各接種在75cm塑料培養(yǎng)瓶中,置于37℃、體積分?jǐn)?shù)為0.05的CO2孵箱中,用10%的FCSEMEM進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)兩種細(xì)胞各生長(zhǎng)至匯合時(shí),用0.25%的胰酶消化、離心并沉淀細(xì)胞后,然后再用無(wú)血清的EMEM洗滌細(xì)胞,400g/min離心,共5min,然后棄去上清,使殘留上清不要超過(guò)25μl,然后在獲得的細(xì)胞沉淀中加入1ml稀釋劑C溶液,輕輕吹打形成細(xì)胞懸液;按照PKH26和PKH67試劑盒說(shuō)明書(shū)分別配制4×10-6mol/L的PKH26溶液和4×10-6mol/L的PKH67溶液,然后把ECV304細(xì)胞懸液加入到PKH26染液、HKC細(xì)胞加入到PKH67染液中,各自吹打均勻,并于室溫下放置2~5min。之后加入2ml血清,室溫下放置1min,再用10%EMEM4ml稀釋上述細(xì)胞懸液,25℃條件下1200r/min離心,共10min,棄去上清,去除染色液。用10%EMEM沖洗ECV304、HKC細(xì)胞4次,然后將細(xì)胞移到另一新管中,加入10ml完全培養(yǎng)基,離心,重懸,使兩種細(xì)胞各自的密度調(diào)整在(1.0~2.0)×107/ml,然后把兩種轉(zhuǎn)染細(xì)胞ECV304與HKC細(xì)胞懸液等體積混合,輕輕吹打均勻,制成混合細(xì)胞懸液。

2.2標(biāo)記細(xì)胞的種植:將實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組的AV400濾器(Fresenius公司0.7m2)均用無(wú)血清的EMEM培養(yǎng)基沖洗,再把無(wú)血清EMEM配制的層黏連蛋白0.74mg/ml[1]注入濾器中,置于37℃孵箱中1h,之后將其抽去。然后把標(biāo)記的種子細(xì)胞混合液平均分成4次注入濾器內(nèi)腔,兩次注射時(shí)間間隔為1h,每次注射完畢后按方向標(biāo)記放置濾器,待下次注射結(jié)束后依照固定方向?qū)V器轉(zhuǎn)動(dòng)90°,總共進(jìn)行4次,完成360°循環(huán)。對(duì)照組只在AV400濾器中注入不含細(xì)胞的培養(yǎng)基,注射方法及放置方法同實(shí)驗(yàn)組。最后把兩組濾器的外腔注滿培養(yǎng)基,置于37℃、體積分?jǐn)?shù)為0.05的CO2孵箱中培養(yǎng),濾器中培養(yǎng)液pH<7.2時(shí)即予以更換。于培養(yǎng)第5天時(shí)從兩組濾器中取出中空纖維,用刀片將纖維絲縱向剖開(kāi),磷酸鹽緩沖液(PBS)溶液沖洗2次,然后在熒光顯微鏡下觀察2種轉(zhuǎn)染細(xì)胞在中空纖維上的分布。

3、混合細(xì)胞在中空纖維上生長(zhǎng)狀態(tài)的觀察把2種已轉(zhuǎn)染人Nanog基因的ECV304、HKC置于37℃、體積分?jǐn)?shù)為0.05的CO2孵箱中,用10%FCSEMEM進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)兩種細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合狀態(tài)時(shí),用0.25%的胰酶消化,并對(duì)2種種子細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組所用AV400濾器仍用層黏連蛋白包被。把2種轉(zhuǎn)染細(xì)胞的密度調(diào)至(1.0~2.0)×107/ml,然后把兩者等體積混合,輕輕吹打均勻,制成混合細(xì)胞懸液,然后把細(xì)胞混懸液注入濾器內(nèi)腔,注射方法與放置方法同2.2部分。對(duì)照組只在AV400濾器中注入不含細(xì)胞的培養(yǎng)基,注射方法及放置方法同實(shí)驗(yàn)組。最后將兩組濾器外腔注滿培養(yǎng)液,置于37℃、體積分?jǐn)?shù)為0.05的CO2孵箱中培養(yǎng),濾器中培養(yǎng)液pH<7.2時(shí)即予以置換。第7天時(shí)從兩組濾器中取出中空纖維,用0.1mol/LPBS沖洗1次,然后再用2.5%戊二醛于4℃冰箱中固定2h,之后再用0.1mol/LPBS溶液沖洗,用刀片將中空纖維沿縱向剖開(kāi),再用0.1mol/LPBS溶液沖洗2次,最后把剖開(kāi)的中空纖維置于1%鋨酸中,4℃冰箱中固定1h。標(biāo)本制作完成后,進(jìn)行掃描電鏡檢測(cè)。

二、結(jié)果

1、中空纖維上混合細(xì)胞PKH26及PKH67標(biāo)記檢測(cè):經(jīng)PKH26染色的ECV304轉(zhuǎn)染細(xì)胞及經(jīng)PKH67染色的HKC轉(zhuǎn)染細(xì)胞混合種植于聚砜膜中空纖維上后,可見(jiàn)兩種種子細(xì)胞呈點(diǎn)片狀分布在聚砜膜中空纖維上。熒光顯微鏡下,ECV304細(xì)胞呈現(xiàn)紅色,而HKC呈現(xiàn)黃綠色。而對(duì)照組則無(wú)紅色或黃綠色的點(diǎn)片狀細(xì)胞群分布。

2、中空纖維上混合細(xì)胞的生長(zhǎng)形態(tài):轉(zhuǎn)染的ECV304細(xì)胞與轉(zhuǎn)染的HKC細(xì)胞混合種植于聚砜膜中空纖維內(nèi)腔7d后,掃描電鏡檢測(cè):對(duì)照組未見(jiàn)細(xì)胞生長(zhǎng);混合細(xì)胞在中空纖維內(nèi)腔上呈片狀生長(zhǎng),并可見(jiàn)細(xì)胞表面的微絨毛。

三、討論

早期的腎臟組織工程主要是模仿腎小球的濾過(guò)功能,人們利用具有類似腎小球?yàn)V過(guò)功能的生物膜(如聚砜膜)建立了血液透析的方法。然而,血濾器在血透過(guò)程中易出現(xiàn)血栓,最終導(dǎo)致濾過(guò)功能下降。為解決血濾器中出現(xiàn)血栓的問(wèn)題,有人將轉(zhuǎn)染水蛭素基因的內(nèi)皮細(xì)胞種植在生物膜材料上,制成生物人工腎小球[3,4],但這種具有抗凝功能的生物人工腎小球只能對(duì)小分子溶質(zhì)進(jìn)行清除和濾過(guò),缺乏物質(zhì)重吸收及內(nèi)分泌等重要功能。

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