引論：我們?yōu)槟砹?篇淺談各科學(xué)在臨床醫(yī)學(xué)的作用范文，供您借鑒以豐富您的創(chuàng)作。它們是您寫(xiě)作時(shí)的寶貴資源，期望它們能夠激發(fā)您的創(chuàng)作靈感，讓您的文章更具深度。
淺談各科學(xué)在臨床醫(yī)學(xué)的作用:微生物學(xué)在臨床醫(yī)學(xué)的作用
在臨床實(shí)驗(yàn)中，臨床醫(yī)師應(yīng)在化驗(yàn)單上寫(xiě)上對(duì)病人的猜測(cè)性診斷，由此來(lái)使臨床實(shí)驗(yàn)醫(yī)師進(jìn)行合理的實(shí)驗(yàn)方法和檢驗(yàn)的程序，從而采集正確的臨床微生物標(biāo)本；一旦臨床實(shí)驗(yàn)室有了實(shí)驗(yàn)結(jié)果和報(bào)告時(shí)，應(yīng)及時(shí)報(bào)告微生物醫(yī)師，從而確立診斷方案。對(duì)于疑難罕見(jiàn)的微生物，臨床醫(yī)師應(yīng)及時(shí)與臨床實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行溝通，從而幫助對(duì)微生物標(biāo)本的判斷和實(shí)驗(yàn)。對(duì)臨床和微生物實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)，微生物醫(yī)師對(duì)其二者的溝通起到了樞紐作用。舉例來(lái)說(shuō)，在微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，若圖涂片發(fā)生了問(wèn)題，應(yīng)由實(shí)驗(yàn)室醫(yī)師及時(shí)與臨床溝通聯(lián)系，然后一起探討原因及結(jié)果。臨床微生物室可以每隔一段時(shí)間派出微生物醫(yī)師進(jìn)行對(duì)臨床微生物感染的討論。對(duì)嚴(yán)重病人，微生物醫(yī)師要參與對(duì)其治療診斷的探討。臨床微生物室應(yīng)與各臨床科室經(jīng)常進(jìn)行意見(jiàn)交流，一同解決有關(guān)微生物學(xué)的諸多問(wèn)題。
一現(xiàn)代臨床微生物學(xué)中對(duì)病原學(xué)診斷的基本要求包括：
（1）提供的臨床標(biāo)本；
（2）了解正常的菌群；
（3）結(jié)合臨床，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；
（4）病原學(xué)診斷需、合理；
（5）微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)及時(shí)報(bào)告實(shí)驗(yàn)的結(jié)婚；
（6）加強(qiáng)對(duì)檢驗(yàn)項(xiàng)目的質(zhì)量控制。
現(xiàn)代感染性疾病診斷最重要的一步為采集恰當(dāng)?shù)臉?biāo)本，從而要求臨床醫(yī)師能夠獲取代表感染性疾病的標(biāo)本。細(xì)菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的前提是了解知曉人體的正常菌群。在做微生物實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)聯(lián)合臨床，做定性、定位和定量的實(shí)驗(yàn)分析，患者的臨床診斷以及恰當(dāng)?shù)呐R床實(shí)驗(yàn)標(biāo)本由臨床醫(yī)師提供，然后進(jìn)行的討論分析，從而更加的為患者負(fù)責(zé)。微生物室應(yīng)在涂片結(jié)果，敏感結(jié)果以及結(jié)果出來(lái)時(shí)及時(shí)與臨床醫(yī)師聯(lián)系，對(duì)病情做有力的報(bào)告?，F(xiàn)代臨床微生物學(xué)應(yīng)對(duì)各種檢驗(yàn)項(xiàng)目加強(qiáng)質(zhì)量控制，從而保障檢驗(yàn)結(jié)果的性。現(xiàn)代臨床微生物學(xué)要求參與醫(yī)院感染疾病的監(jiān)測(cè)、管理和控制。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室的作用有：加強(qiáng)對(duì)病原學(xué)診斷、微生物抗藥性以及環(huán)境、器械的監(jiān)測(cè)；加強(qiáng)醫(yī)院的消毒與滅菌；對(duì)流行病進(jìn)行試驗(yàn)，并加以控制。
二臨床微生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)醫(yī)院感染的要求有：
（1）加強(qiáng)對(duì)醫(yī)院感染的監(jiān)測(cè)；
（2）臨床微生物室參與醫(yī)院的教育工作；
（3）對(duì)消毒隔離加強(qiáng)管理；
（4）對(duì)抗菌性藥物進(jìn)行試驗(yàn)，快速試驗(yàn)的報(bào)告。
若在臨床實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)微生物的感染問(wèn)題，應(yīng)及時(shí)與臨床醫(yī)師聯(lián)系溝通，及時(shí)與控制感染的科室進(jìn)行必要的聯(lián)系；一般提醒臨床對(duì)于病菌的來(lái)源，可在一定程度上預(yù)防病菌的傳播與擴(kuò)散；臨床微生物實(shí)驗(yàn)室要經(jīng)常定期抽調(diào)人員去參與醫(yī)院進(jìn)行的教育工作，從而更加的對(duì)微生物菌體做出更的判斷；正確消毒對(duì)微生物菌體的預(yù)防和控制非常重要。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室的工作包括正確的對(duì)消毒隔離工作進(jìn)行指導(dǎo)和監(jiān)察，并且在特殊情況下，參與對(duì)特殊耐藥細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)工作并制定消毒隔離的措施。臨床微生物室應(yīng)定期對(duì)微生物耐藥性的監(jiān)測(cè)結(jié)果，這將對(duì)臨床的救治成功率大有幫助?，F(xiàn)代臨床微生物學(xué)在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中對(duì)實(shí)際臨床中的感染控制工作發(fā)揮著舉足輕重的作用。臨床微生物學(xué)要求緊密結(jié)合與臨床之間的關(guān)系，并且還要牢牢掌握最基本的知識(shí)，對(duì)常規(guī)的微生物檢驗(yàn)工作要快速進(jìn)行，判斷要，并且應(yīng)即有速度又有質(zhì)量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果做出報(bào)告。
臨床微生物學(xué)要求實(shí)驗(yàn)結(jié)果與臨床盡可能的相符。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室要加強(qiáng)對(duì)教育培訓(xùn)的宣傳，并能對(duì)在微生物實(shí)驗(yàn)室中實(shí)驗(yàn)的結(jié)果做出合理的解釋?，F(xiàn)代臨床微生物學(xué)不僅對(duì)于高等院校的學(xué)生們，或是對(duì)醫(yī)學(xué)工作者的知識(shí)更新都是極其有必要的。醫(yī)院應(yīng)切實(shí)加強(qiáng)醫(yī)院內(nèi)感染控制的工作，從而為服務(wù)臨床做到更好的服務(wù)。利用臨床微生物學(xué)的基礎(chǔ)知識(shí)以及微生物學(xué)的理論與技能來(lái)進(jìn)行臨床微生物學(xué)的檢驗(yàn)。臨床微生物學(xué)需通過(guò)檢驗(yàn)系統(tǒng)，從中了解各類微生物的特性，快速、有效的做出對(duì)病原學(xué)的診斷及微生物檢驗(yàn)報(bào)告，為治療、診斷措施提供強(qiáng)有力的科學(xué)理論依據(jù)。為醫(yī)學(xué)感染控制提供病原學(xué)診斷是臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)的目的，從而達(dá)到減少、避免和控制病原體的效果。微生物實(shí)驗(yàn)室工作者應(yīng)加強(qiáng)對(duì)微生物標(biāo)本的提取工作，然后寫(xiě)出對(duì)其的研究報(bào)告，為醫(yī)學(xué)臨床提供幫助?，F(xiàn)代臨床微生物學(xué)的任務(wù)包括：獲取標(biāo)本信息，并且學(xué)會(huì)妥善保存與保護(hù)，提高對(duì)微生物的檢驗(yàn)率。利用微生物學(xué)知識(shí)學(xué)會(huì)多種對(duì)微生物檢測(cè)的方法，從中選出的檢測(cè)方式，還包括系統(tǒng)鑒定程序，以及對(duì)檢測(cè)中存在的質(zhì)量控制。
現(xiàn)科學(xué)已研究出多種用來(lái)研究微生物的機(jī)器，對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室工作者的研究工作提供幫助，奧尼爾對(duì)檢測(cè)的快速、有效性提供了前提的條件?，F(xiàn)代臨床微生物檢驗(yàn)要求三定一結(jié)合，即結(jié)合臨床信息，定量、定位和定性分析微生物，了解機(jī)體正常存在的菌種，從而確保微生物標(biāo)本的有效性與性。目前，現(xiàn)代臨床微生物學(xué)的檢驗(yàn)正朝向器械化、自動(dòng)化以及分子微生物的方面發(fā)展?，F(xiàn)代臨床微生物學(xué)在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)感染控制中的作用變得越來(lái)越重要，微生物感染可能來(lái)源于互相交流間的交叉感染，也可能來(lái)源于內(nèi)源性感染。對(duì)微生物感染的控制將是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)面臨的一大難題，并且一步步得到突破發(fā)展。
作者：王丹單位：河北醫(yī)科大學(xué)臨床學(xué)院
淺談各科學(xué)在臨床醫(yī)學(xué)的作用:電泳技術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)的作用
1CE在臨床檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的應(yīng)用
1.1血清蛋白質(zhì)分析
血清蛋白電泳通常是臨床上在無(wú)論何種原因引起的血液沉降率增加時(shí)都需要進(jìn)行的常規(guī)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)項(xiàng)目，它將有助于確診臨床報(bào)告的炎癥或感染的狀況及提示進(jìn)一步檢測(cè)其他項(xiàng)目。采用CE可分離血清蛋白，并能計(jì)算各蛋白質(zhì)的相對(duì)濃度，避免了凝膠電泳法染色、脫色過(guò)程中多種影響因素造成的誤差，CE法的結(jié)果重復(fù)性好，可信度高［11］。前清蛋白在血清中的濃度可表明營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，且是確定惡性腫瘤、炎癥、肝硬化、霍奇金病的重要指標(biāo)，多數(shù)電泳法難以分辨，而用CE法很容易分離定量，檢測(cè)波長(zhǎng)為214或200nm。CE不僅增加了清蛋白部分的分辯率，對(duì)雙清蛋白血癥檢測(cè)的靈敏度也有了很大的提高。CE提供了足夠的在α1區(qū)的分辯率以區(qū)分α1酸性糖蛋白與α1抗胰蛋白酶。在α2區(qū)的球蛋白區(qū)，α2巨球蛋白與觸球蛋白不易區(qū)分，但在β-球蛋白區(qū)具有高分辯率［12］。CE法對(duì)腎病、慢性感染、自身免疫病和肝硬化等多種疾病的免疫球蛋白分析有較好的優(yōu)勢(shì)。
1.2單克隆免疫球蛋白的特征鑒別
單克隆免疫球蛋白是一種過(guò)度合成的單一類型或亞型的異常免疫球蛋白。它的產(chǎn)生是由于單一克隆的惡性或高致敏B細(xì)胞的無(wú)限增殖，從而產(chǎn)生同源性的單克隆免疫球蛋白。單克隆免疫球蛋白組分的檢測(cè)運(yùn)用了各種與免疫學(xué)、血液學(xué)和生物化學(xué)等領(lǐng)域相關(guān)的技術(shù)和儀器。通過(guò)用特異性抗體包被的瓊脂糖凝膠球消除一個(gè)特殊的峰來(lái)指示是哪種單克隆成分，借此對(duì)免疫球蛋白的型、亞型和輕鏈型予以鑒定和分類［13］。這一技術(shù)提高了對(duì)該蛋白組分的分析與研究水平。
1.3血紅蛋白成分的分析
在地貧高發(fā)區(qū)檢測(cè)出地貧高風(fēng)險(xiǎn)夫婦和預(yù)防地貧患兒出生是關(guān)系到提高我國(guó)出生人口素質(zhì)和實(shí)現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育工作的一個(gè)重要任務(wù)。其中血紅蛋白(Hb)電泳是研究和分離異常血紅蛋白的有效方法，亦是診斷血紅蛋白分子病和地貧不可缺少的手段之一［15］。毛細(xì)管電泳法是在充滿電泳液的石英毛細(xì)管中進(jìn)行電泳的技術(shù)，在溶血試劑中進(jìn)行稀釋的紅細(xì)胞樣品，會(huì)被注射到毛細(xì)管的負(fù)極端，在高壓電的作用下競(jìng)相電泳分離，然后Hb會(huì)被靠近正極端的415nm光波檢測(cè)裝置檢測(cè)到［16］。通過(guò)毛細(xì)管電泳將蛋白質(zhì)分離，采用波長(zhǎng)為200nm氘光源和CCD探測(cè)器，對(duì)血紅蛋白成分分析靈敏度和分辨率高［17］。CE是一種敏感度和度較高的分析方法，具有操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)［18］。通過(guò)使用堿性pH緩沖液，正常和異常(或變異體)血紅蛋白按下列順序檢測(cè)出來(lái)，從陰極到陽(yáng)極依次為:δA''''2(A2變異體)，C，A2/O-阿拉伯血紅蛋白(O-Arab)，E，S，D，G費(fèi)城血紅蛋白(G-Philadelphia)，F(xiàn)，A，Hope，Bart，J，N-巴爾的摩血紅蛋白(N-Baltimore)和H。在CE區(qū)帶中不出現(xiàn)碳酸酐酶，不但可以鑒別出HbA2變異體，還能夠檢測(cè)HbA、HbF、HbA2含量以及其他異常血紅蛋白，可用于診斷地中海貧血及其他血紅蛋白病［19］。
1.4尿蛋白質(zhì)分析
臨床醫(yī)生和生物學(xué)家關(guān)注的尿蛋白檢查的概念正在逐步更新。蛋白尿的分析得益于近年來(lái)重要的方法學(xué)的進(jìn)步，特別是根據(jù)分子量和所帶電荷來(lái)分離蛋白質(zhì)的電泳技術(shù)。當(dāng)今的生物學(xué)技術(shù)主要應(yīng)用電泳方法來(lái)檢測(cè)游離輕鏈，并用免疫學(xué)技術(shù)來(lái)分析它們的特性。免疫游離輕鏈?zhǔn)悄I臟損害的直接原因，最常見(jiàn)的是腎小管性或系統(tǒng)性。這一毒性的出現(xiàn)可以是在尿中顯現(xiàn)沉淀，也可以在間質(zhì)中沉積。在過(guò)去的幾年里，有關(guān)免疫球蛋白輕鏈毒性因素方面的認(rèn)識(shí)已有了很大的進(jìn)展。電泳異常條帶位于β或γ區(qū)的病例中有三分之二的情況存在本周氏蛋白。一條或多個(gè)條帶是根據(jù)尿液中單克隆免疫球蛋白存在與否進(jìn)行識(shí)別，并且與典型的腎損傷或腎功能不全相關(guān)［20］。游離輕鏈常常沉積在腎小管中，導(dǎo)致腎小管中毒。由于蛋白尿定量與腎臟損害相關(guān)，形成蛋白尿的特定蛋白性質(zhì)就反映了腎單位病變所在的位置和腎功能異常的發(fā)病機(jī)理。尿中特定蛋白的分析可以認(rèn)為是如同一個(gè)真正的生化活檢，它可即刻提供腎單位內(nèi)部的狀況［21］。
1.5肌紅蛋白分析
肌紅蛋白異常增高常在急性心梗后患者的血液和尿液中出現(xiàn)，而免疫比濁法難以測(cè)定低濃度的肌紅蛋白。但是，CE可在8min內(nèi)快速分離尿中低濃度肌紅蛋白并與血紅蛋白相鑒別。
1.6脂蛋白分析
CE可將血漿脂蛋白分離出14個(gè)亞組分，如在分離緩沖液中加入表面活性劑，可在短時(shí)間內(nèi)對(duì)2個(gè)主要組分:高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)進(jìn)行定量，對(duì)LDL進(jìn)一步分離為3個(gè)亞組分:LDL、中密度脂蛋白(IDL)和極低密度脂蛋白(VLDL)，并對(duì)各組分的比例進(jìn)行推算，從而對(duì)脂蛋白異常提供不同脂肪代謝的信息。
1.7糖化血紅蛋白(HbA1c)分析
血紅細(xì)胞中的血紅蛋白糖基化部分即為糖化血紅蛋白(HbA1c)。HbA1c的水平與測(cè)定前數(shù)周內(nèi)的血糖水平呈正線性相關(guān)，因此對(duì)糖尿病患者測(cè)定糖化血紅蛋白可了解過(guò)去一段較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)的血糖水平。此測(cè)定并不能作為糖尿病的診斷，但可用于作為控制血糖的指標(biāo)，糖化血紅蛋白的量還可作為評(píng)價(jià)各種治療措施效果的標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)用CE進(jìn)行HbA1c電泳能分離幾種糖蛋白的糖基構(gòu)型，可鑒別糖化血紅蛋白A1、A1c和其他異構(gòu)體，對(duì)糖尿病的監(jiān)控具有重要意義。
1.8同工酶的分離
應(yīng)用CE技術(shù)對(duì)多種同工酶進(jìn)行了成功的分離。其方法是先使用CE法分離樣品形成同工酶區(qū)帶后，切斷電源，并加入含底物的緩沖液，酶催化底物顯色，進(jìn)一步形成可被檢測(cè)區(qū)帶，又接通電源，再次電泳，使被檢測(cè)的同工酶染色區(qū)帶先后通過(guò)檢測(cè)器，測(cè)定較大吸收峰值即測(cè)定和分析被分離的同工酶。如檢測(cè)淀粉酶P(胰)和S(唾液)型等，均可采用HPCE技術(shù)分離其同工酶。
1.9免疫復(fù)合物分析
CE可將免疫復(fù)合物從結(jié)合的抗原抗體中迅速分離出來(lái)，應(yīng)用熒光標(biāo)記單克隆抗體，經(jīng)LIF-CE檢測(cè)，檢測(cè)限可達(dá)毫克級(jí)，可用于混合液體中低濃度的免疫復(fù)合物鑒定。
1.10DN段和染色體分析
CE分離DNA分子需多聚物交聯(lián)劑如聚丙烯酰胺、聚乙二醇、甲基纖維素等材料添加到緩沖液中作為分子篩，可對(duì)相差一個(gè)甚至幾個(gè)堿基DNA高效分離。有作者［22］應(yīng)用CE做X連鎖隱性遺傳病研究，成功地對(duì)DNA限制片段進(jìn)行了基因多態(tài)性分析。研究表明CE可用于分析拾攜帶者及胎兒產(chǎn)前診斷。
1.11在治療藥物監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用
CE可簡(jiǎn)便快速分析生物樣品中各種有形的藥物成分。在藥理學(xué)研究、法醫(yī)學(xué)檢查及臨床毒理等方面也有廣泛應(yīng)用［23］。在糖尿病的治療監(jiān)測(cè)中，可檢測(cè)血中格列本脲的濃度以防止藥物使用不當(dāng)導(dǎo)致低血糖。
1.12其他小分子/離子的檢測(cè)
CE能在3～4min分離血和尿樣品中的血管造影劑含量、草酸鹽等弱陰離子，檢測(cè)尿樣中十幾種卟啉物質(zhì)和維生素C異構(gòu)體。在新生兒遺傳性有機(jī)酸尿癥篩查用CE可檢測(cè)到時(shí)多種有機(jī)酸標(biāo)志物。
2展望
隨著CE技術(shù)在臨床檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)方面的廣泛應(yīng)用，也必將帶來(lái)更多的挑戰(zhàn)，未來(lái)的CE技術(shù)在細(xì)胞和組織等復(fù)雜生物樣品體系中的臨床檢驗(yàn)分析將成為主要的的發(fā)展趨勢(shì)。生物樣品分析必然要求進(jìn)一步發(fā)展復(fù)雜樣品前處理富集技術(shù)和更靈敏的檢測(cè)技術(shù)。電泳方法的創(chuàng)新性研究主要體現(xiàn)在新分離模式的建立和電泳技術(shù)的聯(lián)用上，例如微乳液毛細(xì)管電動(dòng)色譜(MEEKC)、親和毛細(xì)管電泳(ACE)和芯片毛細(xì)管電泳等;還有將分子信標(biāo)技術(shù)與CE技術(shù)相結(jié)合進(jìn)行可變長(zhǎng)度寡聚核苷酸識(shí)別和基因檢測(cè)［24］;探索利用CE對(duì)PCR產(chǎn)物作DNA單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析篩查點(diǎn)突變等。近年來(lái)我國(guó)在電泳技術(shù)的臨床應(yīng)用上有了迅猛發(fā)展，尤其是陣列毛細(xì)管電泳儀已經(jīng)問(wèn)世，這將克服目前大多數(shù)商品化毛細(xì)管電泳儀只能進(jìn)行單根毛細(xì)管電泳的缺陷，這種高通量的新方法將會(huì)給后基因組時(shí)代的基因分析帶來(lái)革命性的變化。CE技術(shù)作為一種重要的分析手段，隨著它的快速發(fā)展，必將在臨床檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)方面有著更廣泛的應(yīng)用前景并在各種分析分離領(lǐng)域發(fā)揮巨大的發(fā)展?jié)摿Α?
作者：阮麗明周艷潔朱茂靈單位：廣西南寧市人口和計(jì)劃生育服務(wù)中心
淺談各科學(xué)在臨床醫(yī)學(xué)的作用:臨床醫(yī)學(xué)的病理學(xué)教學(xué)作用
1臨床病例討論教學(xué)形式有助于培養(yǎng)學(xué)生臨床思維能力
臨床病理討論就是臨床和病理共同對(duì)臨床死亡病例的尸檢結(jié)果與生前診斷及治療過(guò)程進(jìn)行對(duì)比分析，以汲取經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，既是診斷病理學(xué)的延伸，也是臨床醫(yī)生與病理醫(yī)生密切聯(lián)系，加強(qiáng)協(xié)作的有效途徑。在病理教學(xué)中引入臨床病理討論是提高教學(xué)質(zhì)量和醫(yī)學(xué)整體教育質(zhì)量的一個(gè)好方法。臨床病例討論可在實(shí)驗(yàn)室以小班為單位分組開(kāi)展，精選2-3個(gè)典型病例,引導(dǎo)同學(xué)應(yīng)用現(xiàn)有的知識(shí)從病因、發(fā)病機(jī)制、臨床表現(xiàn)等方面展開(kāi)討論,并回答相關(guān)問(wèn)題，其他組同學(xué)提出疑問(wèn)或補(bǔ)充,老師解答疑難并歸納總結(jié)。臨床病理討論增強(qiáng)基礎(chǔ)理論與臨床實(shí)踐相結(jié)合，不僅是對(duì)授課內(nèi)容的回顧,更重要的是教會(huì)學(xué)生病例分析的基本思路和方法,使學(xué)生能夠?qū)ψ约核鶎W(xué)的知識(shí)進(jìn)行縱向和橫向聯(lián)系,理解各病理過(guò)程之間的相互聯(lián)系,做到把整本教材的內(nèi)容融會(huì)貫通起來(lái),逐漸形成正確的臨床思維過(guò)程。這種學(xué)生和教師之間的互動(dòng)式教學(xué)形式,激發(fā)了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣和學(xué)習(xí)積極性,促使他們認(rèn)真讀書(shū)、獨(dú)立思考、查閱資料、相互討論，有助于培養(yǎng)學(xué)生的臨床思維能力。
2體驗(yàn)尸體解剖和臨床外檢工作有助于學(xué)生更好掌握病理知識(shí)
病理學(xué)很重視疾病的形態(tài)學(xué)變化，而很多疾病的病理變化的獲得來(lái)自細(xì)致的觀察和實(shí)踐。學(xué)生看到的病理教學(xué)標(biāo)本都是經(jīng)過(guò)福爾馬林固定，其大小、顏色、硬度與新鮮標(biāo)本有所不同，教學(xué)切片也是經(jīng)過(guò)多道程序事先制好的，病變區(qū)域的形狀、大小可因切面而不同。為使學(xué)生能正確且熟練地辨認(rèn)病變的標(biāo)本、病理切片,應(yīng)盡可能的讓學(xué)生有機(jī)會(huì)接觸臨床病理工作。一般醫(yī)學(xué)院校都有相應(yīng)的附屬醫(yī)院，病理學(xué)老師都是身兼教學(xué)和臨床外檢工作，因此有條件讓學(xué)生參與尸體解剖工作和臨床外檢工作，讓學(xué)生親生體驗(yàn)一下新鮮的人體病理標(biāo)本是怎樣的，和實(shí)驗(yàn)室看到的經(jīng)固定液固定的標(biāo)本有什么區(qū)別，還可以了解病理切片是怎樣來(lái)的，從而對(duì)課堂上所學(xué)的內(nèi)容有更深刻的體會(huì)，使學(xué)生以后在實(shí)驗(yàn)中觀察病變標(biāo)本時(shí)能較快、正確地描述病理變化，同時(shí)了解病理的工作和流程，日后從事臨床工作后更便于溝通。
3注重教師的素質(zhì)培養(yǎng)是充分發(fā)揮教學(xué)橋梁作用的保障
要充分發(fā)揮病理學(xué)的橋梁作用，首先要求教師應(yīng)具備除病理學(xué)知識(shí)之外的各種基礎(chǔ)和臨床知識(shí)，包括組織胚胎學(xué)、人體解剖學(xué)、病理生理學(xué)、內(nèi)科學(xué)、外科學(xué)等,并能融匯貫通靈活應(yīng)用于教學(xué)，努力做一個(gè)“全能型”教師，這是充分發(fā)揮教學(xué)橋梁作用的保障。教師只有通過(guò)不斷拓寬自身的知識(shí)面,不斷的學(xué)習(xí),提高自身的綜合素質(zhì),力求做到“精通病理學(xué),通曉全科醫(yī)學(xué)”，才能為訓(xùn)練學(xué)生由基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)向臨床醫(yī)學(xué)學(xué)習(xí)轉(zhuǎn)化創(chuàng)造充分的必要的條件。病理學(xué)是醫(yī)學(xué)的主干課程之一,是連接基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)的一門(mén)基礎(chǔ)課程。通過(guò)學(xué)習(xí),除了要教會(huì)學(xué)生疾病的病理改變，更要聯(lián)系臨床知識(shí)，打破了基礎(chǔ)與臨床的界限和學(xué)科的界限，讓學(xué)生更深刻掌握課堂知識(shí)，培養(yǎng)學(xué)生臨床思維能力,為后續(xù)學(xué)習(xí)臨床專業(yè)課、參加臨床實(shí)踐和進(jìn)行疾病的防治奠定基礎(chǔ)，從而能更充分發(fā)揮病理課的橋梁作用，為學(xué)生完成向臨床醫(yī)師的角色轉(zhuǎn)化做好充分準(zhǔn)備。
作者：周新華 趙彤 申洪 丁彥青 單位：南方醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系
臨床醫(yī)學(xué)的病理學(xué)教學(xué)作用
1臨床病例討論教學(xué)形式有助于培養(yǎng)學(xué)生臨床思維能力
臨床病理討論就是臨床和病理共同對(duì)臨床死亡病例的尸檢結(jié)果與生前診斷及治療過(guò)程進(jìn)行對(duì)比分析,以汲取經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn),既是診斷病理學(xué)的延伸,也是臨床醫(yī)生與病理醫(yī)生密切聯(lián)系,加強(qiáng)協(xié)作的有效途徑。在病理教學(xué)中引入臨床病理討論是提高教學(xué)質(zhì)量和醫(yī)學(xué)整體教育質(zhì)量的一個(gè)好方法。臨床病例討論可在實(shí)驗(yàn)室以小班為單位分組開(kāi)展,精選2-3個(gè)典型病例,引導(dǎo)同學(xué)應(yīng)用現(xiàn)有的知識(shí)從病因、發(fā)病機(jī)制、臨床表現(xiàn)等方面展開(kāi)討論,并回答相關(guān)問(wèn)題,其他組同學(xué)提出疑問(wèn)或補(bǔ)充,老師解答疑難并歸納總結(jié)。臨床病理討論增強(qiáng)基礎(chǔ)理論與臨床實(shí)踐相結(jié)合,不僅是對(duì)授課內(nèi)容的回顧,更重要的是教會(huì)學(xué)生病例分析的基本思路和方法,使學(xué)生能夠?qū)ψ约核鶎W(xué)的知識(shí)進(jìn)行縱向和橫向聯(lián)系,理解各病理過(guò)程之間的相互聯(lián)系,做到把整本教材的內(nèi)容融會(huì)貫通起來(lái),逐漸形成正確的臨床思維過(guò)程。這種學(xué)生和教師之間的互動(dòng)式教學(xué)形式,激發(fā)了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣和學(xué)習(xí)積極性,促使他們認(rèn)真讀書(shū)、獨(dú)立思考、查閱資料、相互討論,有助于培養(yǎng)學(xué)生的臨床思維能力。
2體驗(yàn)尸體解剖和臨床外檢工作有助于學(xué)生更好掌握病理知識(shí)
病理學(xué)很重視疾病的形態(tài)學(xué)變化,而很多疾病的病理變化的獲得來(lái)自細(xì)致的觀察和實(shí)踐。學(xué)生看到的病理教學(xué)標(biāo)本都是經(jīng)過(guò)福爾馬林固定,其大小、顏色、硬度與新鮮標(biāo)本有所不同,教學(xué)切片也是經(jīng)過(guò)多道程序事先制好的,病變區(qū)域的形狀、大小可因切面而不同。為使學(xué)生能正確且熟練地辨認(rèn)病變的標(biāo)本、病理切片,應(yīng)盡可能的讓學(xué)生有機(jī)會(huì)接觸臨床病理工作。一般醫(yī)學(xué)院校都有相應(yīng)的附屬醫(yī)院,病理學(xué)老師都是身兼教學(xué)和臨床外檢工作,因此有條件讓學(xué)生參與尸體解剖工作和臨床外檢工作,讓學(xué)生親生體驗(yàn)一下新鮮的人體病理標(biāo)本是怎樣的,和實(shí)驗(yàn)室看到的經(jīng)固定液固定的標(biāo)本有什么區(qū)別,還可以了解病理切片是怎樣來(lái)的,從而對(duì)課堂上所學(xué)的內(nèi)容有更深刻的體會(huì),使學(xué)生以后在實(shí)驗(yàn)中觀察病變標(biāo)本時(shí)能較快、正確地描述病理變化,同時(shí)了解病理的工作和流程,日后從事臨床工作后更便于溝通。
3注重教師的素質(zhì)培養(yǎng)是充分發(fā)揮教學(xué)橋梁作用的保障
要充分發(fā)揮病理學(xué)的橋梁作用,首先要求教師應(yīng)具備除病理學(xué)知識(shí)之外的各種基礎(chǔ)和臨床知識(shí),包括組織胚胎學(xué)、人體解剖學(xué)、病理生理學(xué)、內(nèi)科學(xué)、外科學(xué)等,并能融匯貫通靈活應(yīng)用于教學(xué),努力做一個(gè)“全能型”教師,這是充分發(fā)揮教學(xué)橋梁作用的保障。教師只有通過(guò)不斷拓寬自身的知識(shí)面,不斷的學(xué)習(xí),提高自身的綜合素質(zhì),力求做到“精通病理學(xué),通曉全科醫(yī)學(xué)”,才能為訓(xùn)練學(xué)生由基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)向臨床醫(yī)學(xué)學(xué)習(xí)轉(zhuǎn)化創(chuàng)造充分的必要的條件。病理學(xué)是醫(yī)學(xué)的主干課程之一,是連接基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)的一門(mén)基礎(chǔ)課程。通過(guò)學(xué)習(xí),除了要教會(huì)學(xué)生疾病的病理改變,更要聯(lián)系臨床知識(shí),打破了基礎(chǔ)與臨床的界限和學(xué)科的界限,讓學(xué)生更深刻掌握課堂知識(shí),培養(yǎng)學(xué)生臨床思維能力,為后續(xù)學(xué)習(xí)臨床專業(yè)課、參加臨床實(shí)踐和進(jìn)行疾病的防治奠定基礎(chǔ),從而能更充分發(fā)揮病理課的橋梁作用,為學(xué)生完成向臨床醫(yī)師的角色轉(zhuǎn)化做好充分準(zhǔn)備。
淺談各科學(xué)在臨床醫(yī)學(xué)的作用:論電泳技術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)的作用
1CE在臨床檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的應(yīng)用
1.1血清蛋白質(zhì)分析
血清蛋白電泳通常是臨床上在無(wú)論何種原因引起的血液沉降率增加時(shí)都需要進(jìn)行的常規(guī)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)項(xiàng)目,它將有助于確診臨床報(bào)告的炎癥或感染的狀況及提示進(jìn)一步檢測(cè)其他項(xiàng)目。采用CE可分離血清蛋白,并能計(jì)算各蛋白質(zhì)的相對(duì)濃度,避免了凝膠電泳法染色、脫色過(guò)程中多種影響因素造成的誤差,CE法的結(jié)果重復(fù)性好,可信度高[11]。前清蛋白在血清中的濃度可表明營(yíng)養(yǎng)狀態(tài),且是確定惡性腫瘤、炎癥、肝硬化、霍奇金病的重要指標(biāo),多數(shù)電泳法難以分辨,而用CE法很容易分離定量,檢測(cè)波長(zhǎng)為214或200nm。CE不僅增加了清蛋白部分的分辯率,對(duì)雙清蛋白血癥檢測(cè)的靈敏度也有了很大的提高。CE提供了足夠的在α1區(qū)的分辯率以區(qū)分α1酸性糖蛋白與α1抗胰蛋白酶。在α2區(qū)的球蛋白區(qū),α2巨球蛋白與觸球蛋白不易區(qū)分,但在β-球蛋白區(qū)具有高分辯率[12]。CE法對(duì)腎病、慢性感染、自身免疫病和肝硬化等多種疾病的免疫球蛋白分析有較好的優(yōu)勢(shì)。
1.2單克隆免疫球蛋白的特征鑒別
單克隆免疫球蛋白是一種過(guò)度合成的單一類型或亞型的異常免疫球蛋白。它的產(chǎn)生是由于單一克隆的惡性或高致敏B細(xì)胞的無(wú)限增殖,從而產(chǎn)生同源性的單克隆免疫球蛋白。單克隆免疫球蛋白組分的檢測(cè)運(yùn)用了各種與免疫學(xué)、血液學(xué)和生物化學(xué)等領(lǐng)域相關(guān)的技術(shù)和儀器。通過(guò)用特異性抗體包被的瓊脂糖凝膠球消除一個(gè)特殊的峰來(lái)指示是哪種單克隆成分,借此對(duì)免疫球蛋白的型、亞型和輕鏈型予以鑒定和分類[13]。這一技術(shù)提高了對(duì)該蛋白組分的分析與研究水平。
1.3血紅蛋白成分的分析
在地貧高發(fā)區(qū)檢測(cè)出地貧高風(fēng)險(xiǎn)夫婦和預(yù)防地貧患兒出生是關(guān)系到提高我國(guó)出生人口素質(zhì)和實(shí)現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育工作的一個(gè)重要任務(wù)。其中血紅蛋白(Hb)電泳是研究和分離異常血紅蛋白的有效方法,亦是診斷血紅蛋白分子病和地貧不可缺少的手段之一[15]。毛細(xì)管電泳法是在充滿電泳液的石英毛細(xì)管中進(jìn)行電泳的技術(shù),在溶血試劑中進(jìn)行稀釋的紅細(xì)胞樣品,會(huì)被注射到毛細(xì)管的負(fù)極端,在高壓電的作用下競(jìng)相電泳分離,然后Hb會(huì)被靠近正極端的415nm光波檢測(cè)裝置檢測(cè)到[16]。通過(guò)毛細(xì)管電泳將蛋白質(zhì)分離,采用波長(zhǎng)為200nm氘光源和CCD探測(cè)器,對(duì)血紅蛋白成分分析靈敏度和分辨率高[17]。CE是一種敏感度和度較高的分析方法,具有操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)[18]。通過(guò)使用堿性pH緩沖液,正常和異常(或變異體)血紅蛋白按下列順序檢測(cè)出來(lái),從陰極到陽(yáng)極依次為:δA'2(A2變異體),C,A2/O-阿拉伯血紅蛋白(O-Arab),E,S,D,G費(fèi)城血紅蛋白(G-Philadelphia),F,A,Hope,Bart,J,N-巴爾的摩血紅蛋白(N-Baltimore)和H。在CE區(qū)帶中不出現(xiàn)碳酸酐酶,不但可以鑒別出HbA2變異體,還能夠檢測(cè)HbA、HbF、HbA2含量以及其他異常血紅蛋白,可用于診斷地中海貧血及其他血紅蛋白病[19]。
1.4尿蛋白質(zhì)分析
臨床醫(yī)生和生物學(xué)家關(guān)注的尿蛋白檢查的概念正在逐步更新。蛋白尿的分析得益于近年來(lái)重要的方法學(xué)的進(jìn)步,特別是根據(jù)分子量和所帶電荷來(lái)分離蛋白質(zhì)的電泳技術(shù)。當(dāng)今的生物學(xué)技術(shù)主要應(yīng)用電泳方法來(lái)檢測(cè)游離輕鏈,并用免疫學(xué)技術(shù)來(lái)分析它們的特性。免疫游離輕鏈?zhǔn)悄I臟損害的直接原因,最常見(jiàn)的是腎小管性或系統(tǒng)性。這一毒性的出現(xiàn)可以是在尿中顯現(xiàn)沉淀,也可以在間質(zhì)中沉積。在過(guò)去的幾年里,有關(guān)免疫球蛋白輕鏈毒性因素方面的認(rèn)識(shí)已有了很大的進(jìn)展。電泳異常條帶位于β或γ區(qū)的病例中有三分之二的情況存在本周氏蛋白。一條或多個(gè)條帶是根據(jù)尿液中單克隆免疫球蛋白存在與否進(jìn)行識(shí)別,并且與典型的腎損傷或腎功能不全相關(guān)[20]。游離輕鏈常常沉積在腎小管中,導(dǎo)致腎小管中毒。由于蛋白尿定量與腎臟損害相關(guān),形成蛋白尿的特定蛋白性質(zhì)就反映了腎單位病變所在的位置和腎功能異常的發(fā)病機(jī)理。尿中特定蛋白的分析可以認(rèn)為是如同一個(gè)真正的生化活檢,它可即刻提供腎單位內(nèi)部的狀況[21]。
1.5肌紅蛋白分析
肌紅蛋白異常增高常在急性心梗后患者的血液和尿液中出現(xiàn),而免疫比濁法難以測(cè)定低濃度的肌紅蛋白。但是,CE可在8min內(nèi)快速分離尿中低濃度肌紅蛋白并與血紅蛋白相鑒別。
1.6脂蛋白分析
CE可將血漿脂蛋白分離出14個(gè)亞組分,如在分離緩沖液中加入表面活性劑,可在短時(shí)間內(nèi)對(duì)2個(gè)主要組分:高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)進(jìn)行定量,對(duì)LDL進(jìn)一步分離為3個(gè)亞組分:LDL、中密度脂蛋白(IDL)和極低密度脂蛋白(VLDL),并對(duì)各組分的比例進(jìn)行推算,從而對(duì)脂蛋白異常提供不同脂肪代謝的信息。
1.7糖化血紅蛋白(HbA1c)分析
血紅細(xì)胞中的血紅蛋白糖基化部分即為糖化血紅蛋白(HbA1c)。HbA1c的水平與測(cè)定前數(shù)周內(nèi)的血糖水平呈正線性相關(guān),因此對(duì)糖尿病患者測(cè)定糖化血紅蛋白可了解過(guò)去一段較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)的血糖水平。此測(cè)定并不能作為糖尿病的診斷,但可用于作為控制血糖的指標(biāo),糖化血紅蛋白的量還可作為評(píng)價(jià)各種治療措施效果的標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)用CE進(jìn)行HbA1c電泳能分離幾種糖蛋白的糖基構(gòu)型,可鑒別糖化血紅蛋白A1、A1c和其他異構(gòu)體,對(duì)糖尿病的監(jiān)控具有重要意義。
1.8同工酶的分離
應(yīng)用CE技術(shù)對(duì)多種同工酶進(jìn)行了成功的分離。其方法是先使用CE法分離樣品形成同工酶區(qū)帶后,切斷電源,并加入含底物的緩沖液,酶催化底物顯色,進(jìn)一步形成可被檢測(cè)區(qū)帶,又接通電源,再次電泳,使被檢測(cè)的同工酶染色區(qū)帶先后通過(guò)檢測(cè)器,測(cè)定較大吸收峰值即測(cè)定和分析被分離的同工酶。如檢測(cè)淀粉酶P(胰)和S(唾液)型等,均可采用HPCE技術(shù)分離其同工酶。
1.9免疫復(fù)合物分析
CE可將免疫復(fù)合物從結(jié)合的抗原抗體中迅速分離出來(lái),應(yīng)用熒光標(biāo)記單克隆抗體,經(jīng)LIF-CE檢測(cè),檢測(cè)限可達(dá)毫克級(jí),可用于混合液體中低濃度的免疫復(fù)合物鑒定。
1.10DN段和染色體分析
CE分離DNA分子需多聚物交聯(lián)劑如聚丙烯酰胺、聚乙二醇、甲基纖維素等材料添加到緩沖液中作為分子篩,可對(duì)相差一個(gè)甚至幾個(gè)堿基DNA高效分離。有作者[22]應(yīng)用CE做X連鎖隱性遺傳病研究,成功地對(duì)DNA限制片段進(jìn)行了基因多態(tài)性分析。研究表明CE可用于分析拾攜帶者及胎兒產(chǎn)前診斷。
1.11在治療藥物監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用
CE可簡(jiǎn)便快速分析生物樣品中各種有形的藥物成分。在藥理學(xué)研究、法醫(yī)學(xué)檢查及臨床毒理等方面也有廣泛應(yīng)用[23]。在糖尿病的治療監(jiān)測(cè)中,可檢測(cè)血中格列本脲的濃度以防止藥物使用不當(dāng)導(dǎo)致低血糖。
1.12其他小分子/離子的檢測(cè)
CE能在3~4min分離血和尿樣品中的血管造影劑含量、草酸鹽等弱陰離子,檢測(cè)尿樣中十幾種卟啉物質(zhì)和維生素C異構(gòu)體。在新生兒遺傳性有機(jī)酸尿癥篩查用CE可檢測(cè)到時(shí)多種有機(jī)酸標(biāo)志物。
2展望
隨著CE技術(shù)在臨床檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)方面的廣泛應(yīng)用,也必將帶來(lái)更多的挑戰(zhàn),未來(lái)的CE技術(shù)在細(xì)胞和組織等復(fù)雜生物樣品體系中的臨床檢驗(yàn)分析將成為主要的的發(fā)展趨勢(shì)。生物樣品分析必然要求進(jìn)一步發(fā)展復(fù)雜樣品前處理富集技術(shù)和更靈敏的檢測(cè)技術(shù)。電泳方法的創(chuàng)新性研究主要體現(xiàn)在 新分離模式的建立和電泳技術(shù)的聯(lián)用上,例如微乳液毛細(xì)管電動(dòng)色譜(MEEKC)、親和毛細(xì)管電泳(ACE)和芯片毛細(xì)管電泳等;還有將分子信標(biāo)技術(shù)與CE技術(shù)相結(jié)合進(jìn)行可變長(zhǎng)度寡聚核苷酸識(shí)別和基因檢測(cè)[24];探索利用CE對(duì)PCR產(chǎn)物作DNA單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析篩查點(diǎn)突變等。近年來(lái)我國(guó)在電泳技術(shù)的臨床應(yīng)用上有了迅猛發(fā)展,尤其是陣列毛細(xì)管電泳儀已經(jīng)問(wèn)世,這將克服目前大多數(shù)商品化毛細(xì)管電泳儀只能進(jìn)行單根毛細(xì)管電泳的缺陷,這種高通量的新方法將會(huì)給后基因組時(shí)代的基因分析帶來(lái)革命性的變化。CE技術(shù)作為一種重要的分析手段,隨著它的快速發(fā)展,必將在臨床檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)方面有著更廣泛的應(yīng)用前景并在各種分析分離領(lǐng)域發(fā)揮巨大的發(fā)展?jié)摿Α?
